锤头状核酶在HepG2细胞中抑制adr亚型的乙型肝炎病毒

针对HBV基因组设计了三种锤头状核酶－－RS3、RC2和RC1。将裸露的和用tRNA包埋的核酶（RtS3、RtC2和RtC1）基因插入RNA修剪质粒pRG523中，然后转变为真核表达载体，使用同样克隆技术，构建由不同长度（2、4、8、12个）RS3或12个RtS3连成的鸟枪型真核表达载体，将它们分别与带有HBV基因组的质粒共转染人肝癌细胞系HepG2，用G418筛选抗性细胞。分析不同种类的核酶在G418抗性细胞中的HBV抑制活性，包括子代HBV－DNA、HBV－RNA和抗原（HBsAg或HBcAg/HBeAg)表达的减少。结果表明，所有设计的核酶对HBV有＞70％的抑制活性，而tRNA包埋核酶的活性略高于裸露核酶。特别值得提出的是，由8个或12个相同核酶连接的鸟枪型质粒（8RS3、12RS3和12RsS3）具有很高的抑制HBV活性，达到＞9－％的抑制。

Hammerhead Ribozymes Suppress HBV(adr) in HepG2 Cells