| 人角质细胞生长因子2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 余德荣,游力,王郡甫,许晓群,高春义.人角质细胞生长因子2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].生物技术通讯,2007,18(2):224-226. |
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| 作者姓名： | 余德荣 游力 王郡甫 许晓群 高春义 |
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| 作者单位： | 1. 山东省医学科学院,基础医学研究所,山东,济南,250062
2. 山东大学,山东省立医院生殖医学研究中心,山东省立医院中心实验室,山东,济南,250021 |
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| 摘 要： | 目的:构建人角质细胞生长因子2(hKGF2)基因的高效原核表达载体pET-30a( )-hKGF2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达。方法:从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出去除了信号肽部分的hKGF2基因,克隆到pMD18-T载体,经DNA序列分析后与pET-30a( )表达载体连接,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达6×His-hKGF2,用SDS-PAGE及Western印迹鉴定表达蛋白。结果:构建了表达载体pET-30a( )-hKGF2,经IPTG诱导后,表达的重组蛋白理论相对分子质量约为23000,约占菌体总蛋白的20%。结论:6×His-hKGF2蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中为可溶性高效表达,为获得高纯度、高活性的产物,以及进一步的大规模生产和应用研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人角质细胞生长因子2 克隆 可溶性表达 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）02-0224-03 |
| 修稿时间： | 2006-08-31 |
Cloning and Expression of Human Keratinocyte Growth Factor 2 |
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| YU De-rong,YOU Li,WANG Jun-fu,XU Xiao-qun,GAO Chun-yi.Cloning and Expression of Human Keratinocyte Growth Factor 2[J].Letters in Biotechnology,2007,18(2):224-226. |
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| Authors: | YU De-rong YOU Li WANG Jun-fu XU Xiao-qun GAO Chun-yi |
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| Institution: | 1. Institute of Basic Medicine, Shandong Academy of Medical Sciences, Jinan 250062; 2. Reproductive Medical Center, Shandong Provincial Hospital, Center Laboratory of Shandong Provincial Hospital, Shandong University, Jinan 250021, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human keratinocyte growth factor 2 clone soluable expression |
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