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猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株Nsp10的表达及鉴定
引用本文:周思旋,徐健,周碧君,文明,王开功. 猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株Nsp10的表达及鉴定[J]. 生物技术通报, 2012, 0(9): 109-113
作者姓名:周思旋  徐健  周碧君  文明  王开功
作者单位:1. 贵州省畜牧兽医研究所,贵阳,550005
2. 贵州省贵阳市农业委员会,贵阳,550081
3. 贵州大学动物科学学院,贵阳,550025
基金项目:国家自然科学基金项目,贵州省农业攻关项目[黔科合NY字(2009) 3071];贵州省农业科学院研究生科研创新基金项目
摘    要:为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株非结构蛋白Nsp10,以克隆质粒pMD18-T-Nsp10/JL为模板,将Nsp10基因克隆至原核表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对不同温度和IPTG浓度进行优化,以获得Nsp10蛋白表达的最佳条件,采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况,并通过Western blotting检测其免疫活性。结果表明,Nsp10基因成功克隆至pET-32a,有分子量约为43.4 kD的融合蛋白获得表达,重组蛋白于诱导4 h后达到高峰,IPTG浓度为0.2-1.2 mmol/L时,重组蛋白表达量无明显差异,Western blotting证实该表达蛋白具有反应原性。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  Nsp10  表达

Expression and Identification for Nsp10 of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus JL Strain
Zhou Sixuan , Xu Jian , Zhou Bijun , Wen Ming , Wang Kaigong. Expression and Identification for Nsp10 of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus JL Strain[J]. Biotechnology Bulletin, 2012, 0(9): 109-113
Authors:Zhou Sixuan    Xu Jian    Zhou Bijun    Wen Ming    Wang Kaigong
Affiliation:1Guizhou Institute of Animal and Veterinary Science,Guiyang 550005;2Guiyang Agricultural Committee,Guiyang 550081;3College of Animal Science,Guizhou University,Guiyang 550025)
Abstract:
Keywords:
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