副干酪乳酪杆菌BD5115代谢产物对肠上皮屏障完整性的增强作用及其效应物质的初步研究

目的 筛选具有改善肠上皮屏障功能潜力的益生菌，并进一步探究其作用机制及其生物效应物质。方法 以Caco-2细胞单层跨上皮电阻（transepithelial electrical resistance,TEER）和异硫氰酸荧光素―葡聚糖（FITC-Dextran）的透过率为评价指标，比较不同乳酪杆菌发酵脱脂乳上清对细胞单层完整性的影响及发酵时间对副干酪乳酪杆菌BD5115发酵乳上清活性的影响；采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测乳酪杆菌发酵乳上清及其代谢产物对Caco-2细胞间紧密连接相关基因表达的影响；采用超高效液相色谱和四极杆―静电场轨道阱高分辨质谱仪联用对发酵24 h和6 h的BD5115发酵乳上清中的差异代谢物进行筛选；采用细胞免疫荧光对Caco-2细胞中紧密连接蛋白Occludin进行定位。结果 干酪乳酪杆菌ATCC334和副干酪乳酪杆菌BD5115发酵乳上清能显著增加细胞单层TEER及降低FITC-Dextran的透过率，上调Occludin基因表达，且BD5115发酵乳上清对细胞单层完整性的增强作用优于ATCC...