胰腺癌免疫系统人源化小鼠模型的构建及评估

目的 构建并评估胰腺癌免疫系统人源化小鼠模型，以期为胰腺癌的免疫治疗研究提供理想的临床前模型。方法 应用Ficoll密度梯度离心法，从健康人外周血中分离出新鲜的单个核细胞(peripheral blood mononucear cells, PBMC),经尾静脉注射植入重度联合免疫缺陷小鼠NCG体内，以构建免疫系统人源化小鼠模型，随后在小鼠皮下植入人胰腺癌细胞系Aspc1,并定期监测肿瘤生长情况，在PBMC植入后第3周，应用断尾法采集小鼠外周血进行流式分析，检测人CD45⁺细胞的水平，当肿瘤生长至100～200 mm³时开始给予抗PD-1单抗治疗，持续治疗3周后，对小鼠施行安乐死并取材，应用流式细胞术、免疫组化等方法分析胰腺癌免疫系统人源化小鼠外周血、脾、骨髓及肿瘤组织中人免疫细胞的浸润及活化情况。结果 植入人PBMC 3周后，在小鼠外周血、脾及骨髓中可检测到较高水平的人CD45⁺细胞；重建的人源免疫系统能够显著抑制人胰腺癌肿瘤的生长(P<0.01,P<0.001),并被人抗PD-1单抗活化，促进肿瘤组织中细...