布鲁氏菌外膜蛋白OMP25诱导BALB/c小鼠免疫反应的分析

目的 本研究旨在分析布鲁氏菌外膜蛋白OMP25诱导机体产生的免疫反应。方法 采用PCR方法扩增羊种布鲁氏菌16M的omp25基因，克隆至pET-32a质粒。重组质粒pET32a-OMP25转化至大肠杆菌BL21(DE3)中，并诱导表达。利用Ni²⁺柱纯化试剂盒进行蛋白纯化。用纯化的重组蛋白(rOMP25)和Rev.1疫苗株免疫小鼠，检测小鼠脾细胞中IFN-γ和IL-2的水平，以及小鼠血清中IgG抗体和抗炎因子IL-10水平，并用Western Blot检测反应原性。结果 (1)omp25基因大小为642 bp,编码214个氨基酸，rOMP25大约在40.8×10³处出现蛋白条带，纯化后为单一条带。(2)用t检验方法统计显示，rOMP25免疫小鼠后，诱导脾细胞产生IFN-γ和IL-2的水平，小鼠血清中IgG和IL-10的水平与Rev.1组相似，显著高于对照组(P<0.01)。(3)Western Blot检测结果显示，rOMP25具有较好的反应原性。结论 rOMP25具有较好的免疫原性和反应原性，为进一步研究OMP25蛋白的功能，以及研制...