| 猪链球菌国内分离株精氨酸脱亚氨酶的克隆表达及其活性分析 |
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| 引用本文： | 张金秋,陆承平. 猪链球菌国内分离株精氨酸脱亚氨酶的克隆表达及其活性分析[J]. 微生物学报, 2007, 47(5): 860-864 |
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| 作者姓名： | 张金秋 陆承平 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 根据GenBank上精氨酸脱亚氨酶(arginine deiminase,AD)序列AF546864,设计并合成一对引物,用PCR检测29株猪链球菌和7株马链球菌兽疫亚种的ad基因,发现29株猪链球菌均能检出此基因,而7株马链球菌兽疫亚种均未检出。扩增出的猪链球菌2型(SS2)强毒株HA9801的ad基因片段,定向克隆至pBAD/Myc-HisC严紧型质粒并转化TOP10。阳性重组菌经L-阿拉伯糖诱导,表达出分子量约47000Da的重组蛋白。经镍柱亲和层析,获得纯化的重组酶。活性分析显示,该酶具有巯基酶和金属酶的特征,其最适反应温度为37℃,最适pH值为6.5。Western blot分析显示,该酶能与SS2-HA9801全菌制备的兔抗血清发生特异性反应,表明其具有一定的免疫原性。检测该酶有助于进一步分析猪链球菌可能的毒力因子。
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| 关 键 词： | 猪链球菌 精氨酸脱亚氨酶 克隆表达 酶活 |
| 文章编号： | 0001-6209（2007）05-0860-05 |
| 收稿时间： | 2007-01-15 |
| 修稿时间： | 2007-07-03 |
Cloning,expression and characterization analysis of the arginine deiminase of Streptococcus suis of China isolates |
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| ZHANG Jin-qiu and LU Cheng-ping. Cloning,expression and characterization analysis of the arginine deiminase of Streptococcus suis of China isolates[J]. Acta microbiologica Sinica, 2007, 47(5): 860-864 |
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| Authors: | ZHANG Jin-qiu and LU Cheng-ping |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunology; Ministry of Agriculture University; Nanjing 210095; China;Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunology; Ministry of Agriculture University; Nanjing 210095; China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Streptococcus suis arginine deiminase cloning and expression enzymatic activities |
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