| 重组腺病毒Ad-HGF体外感染成纤维细胞后转染效率及表达的检测 |
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| 引用本文： | 哈小琴,王澜,劳妙芬,吴祖泽.重组腺病毒Ad-HGF体外感染成纤维细胞后转染效率及表达的检测[J].生物技术通讯,2004,15(1):5-8. |
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| 作者姓名： | 哈小琴 王澜 劳妙芬 吴祖泽 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院,放射医学研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家八六三高技术研究基金(2001AA217061) |
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| 摘 要： | 押检测携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒Ad-HGF在体外对成纤维细胞的感染效率以及感染细胞对目的蛋白的表达。以不同感染复数(m.o.i.)(25,50,100,200)的Ad-GFP感染NIH3T3细胞,48h时用流式细胞仪检测转染效率;以50m.o.i.感染NIH3T3细胞后48h,用ELISA和Western印迹杂交法分别检测感染上清中HGF的表达。分别以50m.o.i.的Ad-GFP和Ad-HGF感染原代培养人瘢痕成纤维细胞,以检测重组腺病毒对原代培养人瘢痕成纤维细胞的转染效率和其对HGF的表达。结果表明,当m.o.i.为50时,重组腺病毒对NIH3T3细胞的转染效率已达95%以上;HGF的表达量可达每2×106细胞249ng;并可检测到HGF蛋白的一特异杂交带。以50m.o.i.的Ad-GFP感染原代培养人瘢痕成纤维细胞,72h时GFP表达达高峰,此时转染效率可高达36.75%。Ad-HGF感染原代培养人瘢痕成纤维细胞后HGF的表达在72h时达高峰,表达量可达每3.3×105细胞66ng。初步认为重组腺病毒可有效地介导HGF基因转染正常或瘢痕成纤维细胞,且感染细胞可有效表达目的蛋白。
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| 关 键 词： | 腺病毒 转染 表达 成纤维细胞 肝细胞生长因子 |
| 文章编号： | 1009-0002(2004)01-0005-04 |
| 修稿时间： | 2003年5月9日 |
Detection of the transfer efficiency and HGF expression in fibroblast in vitro after infection with recombinant adenovirus carrying human HGF gene |
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| HA Xiao-qin,WANG Lan,LAO Miao-fen,WU Chu-tse Beijing Institute of Radiation Medicine,Beijing,China.Detection of the transfer efficiency and HGF expression in fibroblast in vitro after infection with recombinant adenovirus carrying human HGF gene[J].Letters in Biotechnology,2004,15(1):5-8. |
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| Authors: | HA Xiao-qin WANG Lan LAO Miao-fen WU Chu-tse Beijing Institute of Radiation Medicine Beijing China |
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| Institution: | HA Xiao-qin,WANG Lan,LAO Miao-fen,WU Chu-tse Beijing Institute of Radiation Medicine,Beijing100850,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | adenovirus transfection expression fibroblast hepatocyte growth factor |
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