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表达O型口蹄疫病毒衣壳蛋白的重组腺病毒构建及其免疫原性分析
引用本文:王灿灿,张莉萍,刘新生,周鹏,潘丽,王永录. 表达O型口蹄疫病毒衣壳蛋白的重组腺病毒构建及其免疫原性分析[J]. 生物工程学报, 2022, 38(5): 1824-1836
作者姓名:王灿灿  张莉萍  刘新生  周鹏  潘丽  王永录
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室OIE/国家口蹄疫参考实验室, 甘肃 兰州 730046
摘    要:为构建表达O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)衣壳蛋白的复制缺陷型人5型腺病毒(Ad5)为载体的重组腺病毒,本研究设计、合成特异性引物并扩增出FMDV-OZK93的P12A、3B3C基因,通过融合PCR方法连接2个片段,获得P12A3B3C基因后插入到pDC316-mCMV-EGFP质粒,构建了能够表达FMDV-OZK93株衣壳蛋白前体P12A和3B3C蛋白酶的重组穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP-P12A3B3C。利用AdMaxTM腺病毒包装系统进行重组腺病毒rAdv-P12A3B3C-OZK93的包装、鉴定及扩增;并感染人胚胎肾细胞HEK-293进行表达验证。将鉴定正确且高度纯化后的重组腺病毒肌肉免疫小鼠进行免疫原性分析。结果显示,rAdvP12A3B3C-OZK93在病毒传代过程中目的基因稳定存在,且病毒滴度可达1×109.1 TCID50/mL。间接免疫荧光和Western blotting结果均表明rAdv-P12A3B3C-OZK93在HEK-293细胞中表达了FMDV特异...

关 键 词:O型口蹄疫病毒  重组腺病毒  P12A和3B3C  免疫原性
收稿时间:2021-12-08

Construction of recombinant adenovirus expressing capsid protein of serotype O foot-and-mouth disease virus and analysis of its immunogenicity
WANG Cancan,ZHANG Liping,LIU Xinsheng,ZHOU Peng,PAN Li,WANG Yonglu. Construction of recombinant adenovirus expressing capsid protein of serotype O foot-and-mouth disease virus and analysis of its immunogenicity[J]. Chinese journal of biotechnology, 2022, 38(5): 1824-1836
Authors:WANG Cancan  ZHANG Liping  LIU Xinsheng  ZHOU Peng  PAN Li  WANG Yonglu
Affiliation:OIE/National Foot-and-Mouth Disease Reference Laboratory, State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology, Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046, Gansu, China
Abstract:
Keywords:FMDV serotype O  recombinant adenovirus  P12A and 3B3C  immunogenicity
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