| MSTN基因突变纯合子兔的繁育和表型分析北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 尚利青,宋绍征,张婷,严坤宁,蔡何清,袁玉国,成勇.MSTN基因突变纯合子兔的繁育和表型分析北大核心CSCD[J].生物工程学报,2022,38(5):1847-1858. |
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| 作者姓名： | 尚利青 宋绍征 张婷 严坤宁 蔡何清 袁玉国 成勇 |
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| 作者单位： | 扬州大学 兽医学院, 江苏 扬州 225009;无锡太湖学院 基础医学系, 江苏 无锡 214064 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（政府间合作项目）（2016YFE0126000） |
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| 摘 要： | 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因是动物骨骼肌生长的负调控基因。本研究在获得MSTN基因双等位突变原代兔的基础上,培育具有“双肌”表型性状和稳定遗传的MSTN^(–/–)纯合突变兔,建立原代MSTN双等位突变兔繁育纯合子后代的方法。应用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备MSTN–/–突变原代兔,原代双等位突变兔与野生型兔配种,产生F1代兔。同一突变系的F1代兔半同胞交配或回交繁殖F2代纯合子兔;后代兔利用基因组DNA PCR扩增产物序列分析和T载体克隆测序鉴定用于筛选纯合子兔;14–19周龄MSTN基因突变兔称量体重。MSTN基因突变兔臀大肌组织切片,统计分析肌纤维横截面积。获得5只MSTN基因突变原代兔,其中3只用于纯合子培育,共获得15只(5种突变子)纯合突变兔(M2-a:3只;M2-b:2只;M3-a:2只;M7-a:6只;M7-b:2只)。在14–19周龄,MSTN^(–/–)纯合突变兔体重极显著高于同龄MSTN+/+野生型兔(平均(2718±120)g和(1969±53)g,P<0.01,同龄体重提高38.0%);纯合突变兔的臀大肌纤维平均截面积极显著高于野生型兔((3512.2±439.2)μm^(2)和(1274.8±327.3)μm^(2),P<0.01),也显著高于MSTN^(+/–)半合子兔((3512.2±439.2)μm^(2)和(2610.4±604.4)μm^(2),P<0.05)。本研究成功培育了5种MSTN^(–/–)基因纯合突变兔,且有明显瘦肉表型。研究表明,应用CRISPR/Cas9基因编辑获得的原代双等位突变兔为非嵌合体突变兔,突变性状遗传后代;原代双等位突变兔后代分离为两个不同突变子,并都呈现“双肌”表型;F1代单等位突变兔通过近交或回交可获得MSTN^(–/–)纯合突变兔。该研究在利用基因编辑技术培育优良家畜品种方面取得了实验进展。
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| 关 键 词： | 肌肉生长抑制素 繁育 突变 CRISPR/Cas9 新西兰兔 |
| 收稿时间： | 2021/9/25 0:00:00 |
Propagation and phenotypic analysis of mutant rabbits with MSTN homozygous mutation |
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| SHANG Liqing,SONG Shaozheng,ZHANG Ting,YAN Kunning,CAI Heqing,YUAN Yuguo,CHENG Yong.Propagation and phenotypic analysis of mutant rabbits with MSTN homozygous mutation[J].Chinese Journal of Biotechnology,2022,38(5):1847-1858. |
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| Authors: | SHANG Liqing SONG Shaozheng ZHANG Ting YAN Kunning CAI Heqing YUAN Yuguo CHENG Yong |
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| Institution: | College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;Department of Basic Medicine, Wuxi Taihu University, Wuxi 214064, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | myostatin propagation and breeding mutation CRISPR/Cas9 New Zealand rabbits |
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