| 特异性三重PCR快速检测副溶血性弧菌 |
| |
| 引用本文： | 陈丽萍,刘忠民,陈芸,张继伦,彭云霞.特异性三重PCR快速检测副溶血性弧菌[J].微生物学通报,2014,41(4):764-775. |
| |
| 作者姓名： | 陈丽萍 刘忠民 陈芸 张继伦 彭云霞 |
| |
| 作者单位： | 1. 云南出入境检验检疫局 云南 昆明 650228;1. 云南出入境检验检疫局 云南 昆明 650228;1. 云南出入境检验检疫局 云南 昆明 650228;2. 上海出入境检验检疫局 上海 200135;1. 云南出入境检验检疫局 云南 昆明 650228 |
| |
| 基金项目： | 国家认证认可监督管理委员会行业标准专项项目(No. 2010B152) |
| |
| 摘 要： | 【目的】建立同时检测副溶血性弧菌gyrase、tdh、trh基因的三重PCR快速检测方法。【方法】将已报道的这3种基因的引物加入一个PCR反应管中,对引物浓度和退火温度进行优化,找到最佳引物比例和扩增条件。通过特异性验证、灵敏度验证以及方法间对比进行方法确认,其PCR产物使用全自动毛细管电泳分析系统进行分析。【结果】仅在91、269、485 bp处分别出现预期DNA扩增条带;纯培养条件下,扩增gyrase、tdh、trh的菌浓度检测限分别为6.6×101、6.6×102和6.6×101 CFU/mL;本底干扰物存在时,扩增gyrase、tdh、trh的菌浓度检测限分别为6.6×103、6.6×104和6.6×103 CFU/mL;模板DNA浓度检测限为1.36μg/L。检测进境海产品时,检测结果和FDA 2004标准结果一致,且更易辨认和判断。【结论】此检测方法的成功建立,为副溶血性弧菌及携带tdh和/或trh基因的致病性副溶血性弧菌的检测提供了一种准确、高效、便捷的分子技术手段。
|
| 关 键 词： | 副溶血性弧菌，三重PCR，gyrase基因，tdh基因，trh基因，全自动DNA毛细管电泳 |
Specific multiplex-PCR method for rapid detection of Vibrio parahaemolyticus |
| |
| CHEN Li-Ping,LIU Zhong-Min,CHEN Yun,ZHANG Ji-Lun and PENG Yun-Xia.Specific multiplex-PCR method for rapid detection of Vibrio parahaemolyticus[J].Microbiology,2014,41(4):764-775. |
| |
| Authors: | CHEN Li-Ping LIU Zhong-Min CHEN Yun ZHANG Ji-Lun and PENG Yun-Xia |
| |
| Institution: | 1. Yunnan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Kunming, Yunnan 650228, China;1. Yunnan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Kunming, Yunnan 650228, China;1. Yunnan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Kunming, Yunnan 650228, China;2. Shanghai Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shanghai 200135, China;1. Yunnan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Kunming, Yunnan 650228, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Vibrio parahaemolyticus Multiplex-PCR gyrase gene tdh gene trh gene Automatic capillary electrophoresis |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《微生物学通报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《微生物学通报》下载免费的PDF全文 |
|
