| 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞类器官三维培养体系的建立 |
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| 作者姓名： | 韦娟 徐楚帆 朱晓燕 刘宇健 |
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| 作者单位： | 1. 上海体育学院运动科学学院教育部运动与健康科学重点实验室上海市运动与代谢健康前沿科学研究基地;2. 南京体育学院运动健康学院;3. 上海交通大学医学院附属新华医院麻醉与重症医学科;4. 海军军医大学基础医学院生理学教研室 |
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| 基金项目： | supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 32171124, 31871156, 81672266)； |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(type 2 alveolar epithelial cells, AT2)类器官三维(three-dimensional, 3D)培养体系的方法。采用酶消化与磁珠分选分离和纯化ICR小鼠肺AT2细胞，proSPC免疫荧光染色鉴定AT2细胞纯度；2维(two-dimensional, 2D)培养8 d,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine, EdU)掺入和荧光染色法观察AT2细胞的增殖与分化；将AT2细胞与小鼠肺成纤维细胞(mouse lung fibroblasts, Mlg) 3D共培养，光学显微镜下观察类器官生长情况，收集生长13d的类器官，2%多聚甲醛固定后行HE染色，荧光染色观察类器官内部形态结构。结果显示，提取AT2细胞纯度超过95%；在体外培养1～8 d期间，AT2细胞EdU荧光染色阴性，未见增殖；AT2细胞形状逐渐趋向扁平鳞状、细胞表面积显著增大；在体外培养3 d后，有部分AT2细胞特异性标志物proSPC阳性细胞开始出现I型肺泡上皮细胞(type 1 alveolar epithelia...
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| 关 键 词： | Ⅱ型肺泡上皮细胞 Ⅰ型肺泡上皮细胞 小鼠肺成纤维细胞 分化 增殖 类器官 |
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