PiggyBac在转基因小鼠制备中的应用 |
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引用本文: | 刘金烨,庄华,孙瑞林,费俭.PiggyBac在转基因小鼠制备中的应用[J].中国细胞生物学学报,2014(7). |
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作者姓名: | 刘金烨 庄华 孙瑞林 费俭 |
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作者单位: | 同济大学生命科学与技术学院;上海南方模式生物研究中心; |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(批准号:2010CB945501)资助的课题~~ |
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摘 要: | 受精卵雄原核裸DNA注射是目前制备转基因小鼠的主要技术,而转基因表达成功率低是这种技术的主要缺点。piggyBac转座子系统已被报道用于制备转基因小鼠,但这一方法是否能够提高转基因的表达成功率尚不清楚。为此,我们利用毛色基因agouti为报告基因,采用piggyBac转座子系统以C57/BL6小鼠为背景进行转基因小鼠的制备。结果表明,将piggyBac转座酶cRNA和转基因载体进行受精卵雄原核共注射后,转基因阳性率为18.4%,转基因表达率为88.89%,显著高于单独进行转基因载体DNA受精卵雄原核注射法。同时,利用agouti基因作为报告基因,可根据毛色变化直接对表达阳性的转基因小鼠进行初步筛选,提高了筛选效率。
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关 键 词: | 转基因小鼠 piggyBac agouti基因 基因表达 受精卵雄原核共注射 |
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