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过量表达拟南芥AtGCS可以提高E.coli的重金属耐受性及富集能力(英文)北大核心CSCD
作者姓名:刘大丽  毛子军  安志刚  马龙彪  鲁振强
作者单位:1.东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室150040;2.黑龙江大学黑龙江省高校甜菜遗传育种重点实验室150080;3.黑龙江大学生物化学与分子生物学重点实验室150080;
基金项目:supported by National Basic Research Program of China(973 Program)(2010CB951301);National Nature Science Foundation of China(No.31070350,31270494 and 31270307)
摘    要:谷胱甘肽(GSH)是一类在生物体内广泛存在,并且是十分重要的重金属毒害保护剂之一。本研究将编码拟南芥γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因AtGCS(GSH合成的关键酶之一)转化到大肠杆菌(BL21)中,通过IPTG诱导过量表达TrxA-AtGCS融合蛋白来分析AtGCS在提高大肠杆菌重金属耐受性方面的作用。过量表达TrxA的大肠杆菌被用作对照。研究结果表明,在1 mmol.L-1Cd2+、Zn2+或Cu2+重金属胁迫下,过量表达TrxA-AtGCS的大肠杆菌细胞的生长状态要明显优于表达TrxA的对照细胞。同时,过量表达TrxA-AtGCS的大肠杆菌表现出超出对照细胞5倍以上的Cd2+、Zn2+和Cu2+累积量和4倍以上的GSH含量,其中,高于对照10倍的Cd2+富集量尤为明显。因而可以得出结论,拟南芥AtGCS的大量表达大大提升了大肠杆菌的谷胱甘肽含量,从而使GSH可以直接或间接地富集更多的重金属离子,进而提高了大肠杆菌对重金属逆境的抗性。

关 键 词:大肠杆菌  重金属耐受性  AtGCS  GSH  富集
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