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日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫cDNA文库的构建
引用本文:苑纯秀,李铭,陈永军,石耀军,吴祥甫,蔡幼民,林矫矫. 日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫cDNA文库的构建[J]. 生物工程学报, 2000, 16(6)
作者姓名:苑纯秀  李铭  陈永军  石耀军  吴祥甫  蔡幼民  林矫矫
作者单位:1.中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所;农业部动物寄生虫学重点开放实验室 上海 200232;2.中国科学院上海生物化学研究所 上海 200231
摘    要:用TRIZOL试剂盒分别提取日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫总RNA,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA,反转录合成第一链cDNA,完成第二链cDNA合成后,凝胶电泳回收500bp以上的片段并过柱纯化后,与载体λZipLox连接。体外包装后分别得到雌、雄成虫cDNA噬菌体表达文库。经测定雌、雄文库容量分别为3.74×106、3.28×106,重组比率均在96%以上,插入片段长度多在1kb左右。通过PCR技术,我们从文库中钓取到EGP、23kD膜蛋白、Actin和GCP的cDNA,其中GCP基因为低丰度表达基因。各项指标表明,我们成功构建了高质量的cDNA文库,可作为研究雌雄成虫基因差异及筛选保护性抗原基因的重要资源。

关 键 词:日本血吸虫,雌、雄成虫cDNA文库

Construction of cDNA Libraries from Mature Female and Male Worm of Schistosoma japonicum Chinese Main Land Strain
YUAN Chun-Xiu,LI Ming,CHEN Yong-Jun,SHI Yao-Jun,WU Xiang-Fu,CAI You-Min,LIN Jiao-Jiao. Construction of cDNA Libraries from Mature Female and Male Worm of Schistosoma japonicum Chinese Main Land Strain[J]. Chinese journal of biotechnology, 2000, 16(6)
Authors:YUAN Chun-Xiu  LI Ming  CHEN Yong-Jun  SHI Yao-Jun  WU Xiang-Fu  CAI You-Min  LIN Jiao-Jiao
Abstract:
Keywords:
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