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| 基因改造Rhodobacter sphaeroides提高 | |
| 引用本文： | 李力,林丹枫,黄建忠.基因改造Rhodobacter sphaeroides提高[J].微生物学通报,2013,40(4):593-602. |
| 作者姓名： | 李力 林丹枫 黄建忠 |
| 作者单位： | 1. 福建师范大学 工业微生物教育部工程研究中心 福建 福州 350108 2. 福建师范大学 生命科学学院 福建 福州 350108 3. 福建省现代发酵技术工程研究中心 福建 福州 350108 |
| 基金项目： | 福建省发改委产业化专项项目(No. 闽财指[2010]358号) |
| 摘 要： | 目的]通过敲除类球红细菌2.4.1基因组中八氢番茄素合成酶基因crtB,让异戊二烯前体更多流向辅酶Q10的合成.引入大肠杆菌编码的分支酸裂解酶基因ubiC和4-羟苯甲酸转移酶基因ubiA,提高4-羟苯甲酸的合成和与聚异戊二烯的连接,从而提高类球红细菌的辅酶Q10产量.方法]以自杀型质粒pSUP202为载体,构建包含crtB基因上游2.5 kb片段,壮观霉素抗性基因,ubiC、ubiA基因和crtB基因下游2.5 kb片段的基因置换质粒,利用结合转移方法转入类球红细菌2.4.1中,利用抗性机制筛选双交换突变株,RT-PCR方法检测引入的ubiC和ubiA基因转录.用HPLC方法测定出发菌株和基因改造菌株的辅酶Q10产量.结果]成功构建出基因置换质粒,筛选出发生基因置换的突变株,RT-PCR证实了外源基因的转录,并且突变株辅酶Q10的产量比出发菌株提高40％.结论]大肠杆菌的ubiC和ubiA基因能够利用自身启动子在类球红细菌中表达,利用基因改造的方法能成功提高类球红细菌的辅酶Q10产量. |
| 关 键 词： | 辅酶Q10 类球红细菌 基因改造 |
Genetic manipulation of Rhodobacter sphaeroides for improved production of coenzyme Q10 |
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| LI Li,LIN Dan-Feng and HUANG Jian-Zhong.Genetic manipulation of Rhodobacter sphaeroides for improved production of coenzyme Q10[J].Microbiology,2013,40(4):593-602. | |
| Authors: | LI Li LIN Dan-Feng and HUANG Jian-Zhong |
| Institution: | 1. Engineering Research Center of Industrial Microbiology, Ministry of Education, Fujian Normal University, Fuzhou, Fujian 350108, China 2. College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou, Fujian 350108, China 3. Engineering Research Center of Fujian Modern Fermentation Technology, Fujian Normal University, Fuzhou, Fujian 350108, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Coenzyme Q10 Rhodobacter shpaeroides Gene manipulation |
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