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L-型钙通道对大鼠胚胎海马神经干细胞增殖和分化的调控
引用本文:冯锦丽,胡德辉,高天明. L-型钙通道对大鼠胚胎海马神经干细胞增殖和分化的调控[J]. 生物化学与生物物理进展, 2007, 34(3): 275-282
作者姓名:冯锦丽  胡德辉  高天明
作者单位:1. 解放军总医院第二附属医院神经内科,北京,100091
2. 南方医科大学基础医学院生理学教研室,广州,510515
3. 南方医科大学基础医学院解剖学教研室,神经生物学教研室,广州,510515
基金项目:国家自然科学基金;广东省自然科学基金;教育部长江学者和创新团队发展计划
摘    要:为鉴定大鼠胚胎海马神经干细胞(NSCs)是否表达功能性的L-型钙通道,L-型钙通道是否参与了对大鼠胚胎NSCs增殖和分化调控.分离孕15天Wistar大鼠胚胎海马组织,制成单细胞悬液,利用无血清培养技术,在添加bFGF、EGF、N-2和B27 supplement的DMEM/F12培养液中进行培养.采用细胞免疫荧光法对原代至第5代细胞进行鉴定,均有巢蛋白(nestin)的表达,第3代nestin阳性细胞比例达97%.把培养的细胞诱导分化5天后,这些细胞表现为神经元和星形胶质细胞的形态,且分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(Tuj1)阳性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性;细胞免疫印迹结果显示,NSCs表达L-型钙通道的Cav1.2α1C亚单位,而无Cav1.3α1D亚单位的表达;利用全细胞膜片钳技术在NSCs上记录到了L-型钙电流,证明了NSCs所表达的L-型钙通道具有功能.进一步对细胞进行药理学干预,发现L-型钙通道的激活不仅可以促进胚胎NSCs的增殖,而且使增殖的NSCs向神经元分化的比例显著增加.以上结果表明,Wistar大鼠胚胎海马NSCs表达功能性的L-型钙通道;L-型钙通道参与了胚胎NSCs增殖和分化的调控.

关 键 词:大鼠  胚胎神经干细胞  L-型钙通道  增殖  分化
收稿时间:2006-07-17
修稿时间:2006-07-17

L-type Calcium Channel Modulates Proliferation and Differentiation of Neural Stem Cells From Rat Embryonic Hippocampus In vitro
FENG Jin-Li,HU De-Hui and GAO Tian-Ming. L-type Calcium Channel Modulates Proliferation and Differentiation of Neural Stem Cells From Rat Embryonic Hippocampus In vitro[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2007, 34(3): 275-282
Authors:FENG Jin-Li  HU De-Hui  GAO Tian-Ming
Affiliation:Department of Neurology, The Second Affiliated Hospital of General Hospital of PLA, Beijing 100091,China;Department of Physiology, Basic Medical Institute, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China;Department of Anatomy, Department of Neurobiology, Basic Medical Institute, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China
Abstract:
Keywords:rat   embryonic neural stem cells   L-type calcium channel   proliferation   differentiation
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