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Gap-Repair方式建立一种基于pBR322-Red的新型重组工程系统
引用本文:李山虎,洪鑫,于梅,陈伟,黄翠芬,周建光. Gap-Repair方式建立一种基于pBR322-Red的新型重组工程系统[J]. 遗传学报, 2005, 32(5): 533-537
作者姓名:李山虎  洪鑫  于梅  陈伟  黄翠芬  周建光
作者单位:1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850
2. 厦门大学生命科学院,厦门,361005
基金项目::军队“十五”医药卫生科学基金(编号:01MA089)~~
摘    要:应用Gap—Repair新技术,以pBR322为载体,在λ噬菌体Red重组酶的作用下,通过同源重组直接从大肠杆菌DY330染色体上亚克隆了长度为6.7kb的包含Red重组酶基因的λ噬菌体左向操纵子基因序列。建立了一种能够随意在不同细菌宿主中转移的基于pBR322-Red的重组工程系统。为了验证pBR322-Red的生物功能,以大肠杆菌染色体上的galk基因为靶标,用Red介导的单链DNA重组技术敲入T→G单碱基突变,使galk基因内编码第145位氨基酸的密码子由TAT转变成TAG,产生了一个琥珀突变。确定了pBR322-Red系统的重组功能。

关 键 词:Gap—Repair Red重组酶 重组工程
文章编号:0379-4172(2005)05-0533-05

Development of a New Recombineering System by Gap Repair
LI Shan-Hu,HONG Xin,YU Mei,CHEN Wei,HUANG Cui-Fen,ZHOU Jian-Guang. Development of a New Recombineering System by Gap Repair[J]. Journal of Genetics and Genomics, 2005, 32(5): 533-537
Authors:LI Shan-Hu  HONG Xin  YU Mei  CHEN Wei  HUANG Cui-Fen  ZHOU Jian-Guang
Affiliation:LI Shan-Hu~1,HONG Xin~1,YU Mei~1,CHEN Wei~2,HUANG Cui-Fen~1,ZHOU Jian-Guang~
Abstract:
Keywords:Gap-Repair  Red recombination system  recombineering
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