| 草鱼出血病病毒基因组的cDNA合成、克隆及部分序列分析 |
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| 引用本文： | 田静,邹桂平,方勤.草鱼出血病病毒基因组的cDNA合成、克隆及部分序列分析[J].Virologica Sinica,1999(1). |
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| 作者姓名： | 田静 邹桂平 方勤 |
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| 作者单位： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
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| 摘 要： | 采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液。提纯的病毒粒子经蛋白酶Ｋ处理和酚氯仿抽提，在１％琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到１１条ｄｓＲＮＡ，利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段。纯化的ｄｓＲＮＡ溶于９０％的ＤＭＳＯ中，７０℃变性１５ｍｉｎ，然后采用随机引物法反转录合成各基因片段的ｃＤＮＡ，并平头连接于ｐＺＥｒＯ２．０载体的ＥｃｏＲＶ位点，电转化ＴＯＰ１０感受态细胞。重组质粒经酶切、ＰＣＲ扩增得到大小不等的插入片段，ｃＤＮＡＲＮＡ斑点杂交的结果进一步证实其插入为目的基因片段。采用循环ＰＣＲ测序的方法，对其插入片段进行了序列测定，对其中第１１片段的部分序列作了报道。
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| 关 键 词： | 草鱼出血病病毒，cDNA克隆，序列分析 |
cDNA Synthesis, Cloning and Partial Nucleotide Sequence of Grass Carp Hemorrhage Virus (GCHV) |
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| Tian Jing,Zou Guiping,Fang,Qin.cDNA Synthesis, Cloning and Partial Nucleotide Sequence of Grass Carp Hemorrhage Virus (GCHV)[J].中国病毒学(英文版),1999(1). |
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| Authors: | Tian Jing Zou Guiping Fang Qin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Grass Carp Hemorrhage Virus cDNA cloning cDNA sequence |
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