雌激素受体α真核表达载体的构建及其转录活性 |
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作者姓名: | 李勤操 郑喜邦 丁丽华 王朝云 韦玮 周岩 张浩 叶棋浓 |
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作者单位: | 1. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100850;广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005 2. 广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005 3. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100850 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,军队医学科研项目 |
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摘 要: | 目的:构建雌激素受体α(ERα)高效真核表达载体,并检测其转录活性。方法:用常规PCR方法特异扩增带有Flag标签的人ERα全长编码序列,经双酶切后将其克隆到真核表达载体pIRESpuro2中,构建重组质粒pIRESpuro2-Flag-ERα;用Westernblot鉴定该重组质粒介导的Flag-ERα在人胚肾细胞株293T中的表达情况;用含雌激素应答元件的报告基因系统检测ERα的转录活性。结果:构建了pIRESpuro2-Flag-ERα重组质粒,该质粒介导的融合蛋白在293T细胞中得到表达,并可以激活含雌激素应答元件的报告基因的活性。结论:ERα高效真核表达载体的构建为进一步研究ERα在乳腺癌中的作用奠定了基础。
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关 键 词: | 雌激素受体α 真核表达载体 转录活性 |
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