| 苹果多酚氧化酶双链RNA干扰(RNAi)研究 |
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| 引用本文： | 曹艳红,章镇,姚泉洪,彭日荷,熊爱生,李贤.苹果多酚氧化酶双链RNA干扰(RNAi)研究[J].分子细胞生物学报,2004,37(6):487-493. |
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| 作者姓名： | 曹艳红 章镇 姚泉洪 彭日荷 熊爱生 李贤 |
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| 作者单位： | 曹艳红（南京农业大学,南京,210095;上海市农业科学院生物技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106）
章镇（南京农业大学,南京,210095）
姚泉洪（上海市农业科学院生物技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106）
彭日荷（上海市农业科学院生物技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106）
熊爱生（上海市农业科学院生物技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106）
李贤（上海市农业科学院生物技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106） |
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| 摘 要： | 以成熟苹果果实的RNA为模板,经RT-PCR扩增并克隆苹果多酚氧化酶(APPO)长度为710bp的反义、正义基因片段.以副球菌中类胡罗卜素合成有关的(crtW+crtY)融合基因片段YYT为间隔区,将APPO反义基因片段、YYT和APPO正义基因片段串联,构成全长为2446bp的DNA并插入到植物双元载体pYPX145中,构成可表达苹果多酚氧化酶双链RNA的植物双元载体pYF7704.以根癌农杆菌介导的叶盘转化法转化苹果栽培品种红富士,通过50mg/L卡那霉素筛选和GUS检测,获得了转基因苹果抗性芽.荧光定量RT-PCR检测结果显示,转基因苹果抗性芽内多酚氧化酶基因的干扰效果达91.69%以上,研究结果证实多酚氧化酶双链RNA干扰在转基因苹果上是可行的.
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| 关 键 词： | 双链RNAi APPO基因 载体构建 遗传转化 苹果 荧光定量 RT-PCR |
| 修稿时间： | 2004年4月26日 |
SUPPRESSION OF APPLE POLYPHENOL OXIDASE BY DOUBLE-STRANDED RNA(RNAi) |
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