翻译和非翻译马铃薯Y病毒外壳蛋白基因介导的抗病性比较

利用RT－PCR方法克隆获得马铃薯Y病毒烟草叶脉坏死株系（PVY^N）的可翻译和不可翻译外壳蛋白（CP）基因，并分别插入pROKⅡ质粒中获得重组双元表达载体。通过根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）介导的基因转化方法，将可翻译和不可翻译的PVY^N-CP基因分别导入烟草栽培品种NC89叶片组织中，得到抗卡那霉素的再生植株，对所得到的抗卡那霉素的再生苗进行PCR检测表明，被导入可翻译和不可翻译CP基因的植株分别占卡那霉素抗性植株的95％和98％。攻毒实验表明，两种类型的转基因烟草对PVY^N的抗病性具有相似性，其表现型为：免疫、抗病和感病。免疫型转基因植株的抗病性不受接种物类型及其剂量的影响。Southern印迹杂交结果显示，目的基因已经整合到烟草基因组中。Northern印迹杂交证明，两种类型的CP基因都已在RNA水平上得到了表达，但细胞内RNA的积累量与转基因植株的抗病强度成负相关。Western印迹杂交表明，在表达不可翻译PVY^N－CP基因的转基因植株内 以CP蛋白，而在导入可翻译的PVY^N-CP基因的植株内检测到了CP蛋白，且CP蛋白含量与抗病性不存在正相关。本研究结果证明，表达可翻译与不可翻译PVY^N-CP基因的转基因烟草对PVY^N的抗病性均为RNA介导的抗病性。

Expression of Translatable and Untranslatable Potato Virus Y(PVYN) Coat Protein(CP)Genes in Tobacco and Comparison of Virus Resistance Between the Transgenic Plants