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精氨酸脱亚胺酶活性以及瓜氨酸转化研究
引用本文:任丽梅,成志远,李晓静,吴会广,袁国强.精氨酸脱亚胺酶活性以及瓜氨酸转化研究[J].氨基酸和生物资源,2015,37(3):69-74.
作者姓名:任丽梅  成志远  李晓静  吴会广  袁国强
作者单位:石药集团中诺药业(石家庄)有限公司酶工程研究所,河北石家庄,050041;石药集团中诺药业(石家庄)有限公司酶工程研究所,河北石家庄,050041;石药集团中诺药业(石家庄)有限公司酶工程研究所,河北石家庄,050041;石药集团中诺药业(石家庄)有限公司酶工程研究所,河北石家庄,050041;石药集团中诺药业(石家庄)有限公司酶工程研究所,河北石家庄,050041
摘    要:目前,L-瓜氨酸的主要生产方法为化学法水解L-精氨酸.利用精氨酸脱亚胺酶可以直接转化L-精氨酸获得L-瓜氨酸,条件温和、效率高、环境友好,因而在工业化生产中具有很好的应用前景.本研究将优化后的单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes)精氨酸脱亚胺酶(ADI)基因序列分别克隆到相应的载体pET-21a、pWB980及pAO815中,并分别转化大肠杆菌BL21(DE3)、枯草芽胞杆菌WB600及毕赤酵母GS115中构建表达菌株.发现大肠杆菌能高效表达ADI.经过5L发酵罐验证,发酵后酶活力单位可达200 000~270 000 U·L-1.经过验证,该酶可以很好地应用于L-瓜氨酸生产.在7 920~17 600 U· L-1的ADI存在条件下,5.5h内,可使95%的浓度为94~258 g·L-1的精氨酸转化为瓜氨酸.该方法具备良好的工业化应用前景.

关 键 词:精氨酸脱亚胺酶  L-精氨酸  L-瓜氨酸  酶转化法

Studies of Arginine Deiminase Activity and Conversion of L-Citrulline
Abstract:
Keywords:arginine deiminase  L-arginine  L-citrulline  enzyme conversion method
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