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| 过碘酸钠氧化辣根过氧化物酶(HRP)中的若干问题及高效果的标记方法 | |
| 作者姓名： | 骆加里 宋光承 陈彩云 |
| 作者单位： | 中国预防医学中心寄生虫病研究所 上海(骆加里，宋光承)，中国预防医学中心寄生虫病研究所 上海(陈彩云) |
| 基金项目： | 本项研究得到联合国开发计划署，世界卫生组织疟疾、血吸虫病、丝虫病合作中心，世界银行，世界卫生组织热带病研究培训特别规划的部分支持~~ |
| 摘 要： | 本文研究了过碘酸钠氧化HRP的某些条件。戊二醛和磷酸盐对酶有一定的影响,而低浓度甲醛和醋酸盐缓冲液(HAcB)则无明显影响。氧化的最适pH在5.6左右。过碘酸钠氧化酶的适宜浓度在0.06～0.015M之间。氧化时间为10～30分钟,过长则影响结合物效价。讨论了加入乙二醇的必要性。醛化的HRP在pH9左右与抗体结合作用的适宜时间为16～24小时,过长则影响酶与抗体的活性,过短则结合不够完全。封闭结合物上多余醛基的KBH_4适宜量为0.1～0.2mg/mg酶。本法标记抗体、抗原和葡萄球菌A蛋白的效果均较好,方法简易,标记效果取决于酶是否能与抗体和抗原相结合,以及标记过程中酶和抗体活性是否受影响。 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |