| 阳离子脂质体介导hFL真核表达载体在骨髓基质细胞系中的表达 |
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| 引用本文： | Ma LJ,Wang GJ,Li L,Hong X,Pei XT. 阳离子脂质体介导hFL真核表达载体在骨髓基质细胞系中的表达[J]. 中国应用生理学杂志, 2001, 17(2): 113-116 |
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| 作者姓名： | Ma LJ Wang GJ Li L Hong X Pei XT |
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| 作者单位： | 1. 白求恩医科大学第一临床学院血液肿瘤科
2. 军事医学科学院输血研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(3990040)及吉林省卫生厅医学科研基金(2000032)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的阳离子脂质体介导hFL真核表达载体pIRESlneo/hFL转染人骨髓基质细胞系HFCL细胞,观察hFL在HFCL细胞中的表达.方法以阳离子脂质体介导法将重组真核表达载体pIRESlneo/hFL导入人骨髓基质细胞系HFCL细胞,G418筛选获得的阳性细胞以Southemblot和Northernblot分别检测其基因组DNA整合和mRNA转录,Westernblot检测其蛋白表达,ELISA及人脐血CD34+细胞增殖实验检测其蛋白表达量和活性.结果hFL基因己整合到靶细胞HFCL基因组DNA中,在mRNA和蛋白质水平上均可检测到其表达,ELISA法测得hFL的表达量为(60.3±0.3)ng.106Cell-1@d-1,分泌量在细胞传代30次后仍保持稳定,并且表达的hFL具有良好的生物学活性.结论阳离子脂质体介导的hFL真核表达载体在人骨髓基质细胞系HFCL中获得持续稳定表达,并具有良好的生物学活性.为转基因骨髓基质细胞移植促进造血重建的体内动物实验研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | hFL 阳离子脂质体 真核表达载体 骨髓基细胞系 |
| 文章编号： | 1000-6834(2001)02-113-04 |
| 修稿时间： | 2000-11-17 |
Expression of a human FL eukaryotic expressing plasmid mediated by lipofectamine in HFCL cells |
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| Ma L J,Wang G J,Li L,Hong X,Pei X T. Expression of a human FL eukaryotic expressing plasmid mediated by lipofectamine in HFCL cells[J]. Chinese journal of applied physiology, 2001, 17(2): 113-116 |
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| Authors: | Ma L J Wang G J Li L Hong X Pei X T |
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| Affiliation: | MA Li Jun 1,WANG Guan Jun 1,LI Liang 2,HONG Xin 2,PEI Xue tao 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hFL lipofectAMINE eukaryotic expressing vector HFCL |
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