| 重组幽门螺杆菌ureA,ureB低温表达、纯化及抗原鉴定 |
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| 引用本文： | 翁康生,廖萍,周名权,吕小枫,陆晔,刘国星. 重组幽门螺杆菌ureA,ureB低温表达、纯化及抗原鉴定[J]. 生物技术, 2003, 13(4): 6-8 |
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| 作者姓名： | 翁康生 廖萍 周名权 吕小枫 陆晔 刘国星 |
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| 作者单位： | 上海市疾病预防控制中心公共卫生与基因研究室,上海,200336 |
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| 摘 要： | 目的：建立经济有效的方法，从大肠杆菌表达，纯化重组幽门螺杆菌尿素酶A、B亚单位。方法：含重组表达质粒pGEX-2T/ureA,pGEX-2T/ureB大肠杆菌分别在不同浓度IPTG、不同温度条件下作诱导培养，以SDS-PAGE分析表达产物，采用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层分离纯化表达产物，以Western-blotting和ELISA对纯化产物作抗原性分析鉴定。结果：IPTG诱导浓度为0.1mmol/L；诱导温度为28℃，含重组质粒大肠杆菌表达可溶性融合蛋白GST-ureA、GST-ureB各约占总表达产物的78%和87%，经亲和层析，得纯度90%以上的GST-ureA约为14mg/L。GST-ureB约为18mg/L；融合蛋白呈ureA、ureB抗原性反应。结论：建立了低温诱导及纯化高纯度ureA、ureB基因表达产物的方法，所得纯化产物具有ureA、ureB抗原活性，为进一步的应用研究打下基础。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 ureA ureB 表达 纯化 抗原 尿素酶 低温培养 |
| 文章编号： | 1004-311X(2003)04-0006-03 |
| 修稿时间： | 2003-01-18 |
Low Temperature Expression,Purification and Antigenicity Assay of Recombinant Helicobacter pylori Urease A,B |
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| WENG Kang-sheng,LIAO Ping,ZHOU Ming-quan,LV Xiao-feng,LU Ye,LIU Guo-xing. Low Temperature Expression,Purification and Antigenicity Assay of Recombinant Helicobacter pylori Urease A,B[J]. Biotechnology, 2003, 13(4): 6-8 |
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| Authors: | WENG Kang-sheng LIAO Ping ZHOU Ming-quan LV Xiao-feng LU Ye LIU Guo-xing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori urease culture expression purification |
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