| 小眼虫藻△8-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 黎明,欧秀元,杨向东,郭东全,钱雪艳,邢来君,魏东盛,李明春.小眼虫藻△8-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达[J].生物工程学报,2010,26(11). |
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| 作者姓名： | 黎明 欧秀元 杨向东 郭东全 钱雪艳 邢来君 魏东盛 李明春 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划)，教育部博士点基金新教师项目 |
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| 摘 要： | △8途径是合成多不饱和脂肪酸的替代途径,△8-脂肪酸脱氢酶是该途径的关键酶之一.根据已报道的△8-脂肪酸脱氢酶基因设计引物,分别从小眼虫藻基因组DNA和cDNA中扩增得到该基因片段,序列分析表明:结构基因长1 266 bp,编码421个氨基酸;该基因没有内含子,比已经报道的△8-脂肪酸脱氢酶基因长6bp,并且N末端序列也有所不同.利用酿酒酵母的载体pYES2.0构建△8-脂肪酸脱氢酶表达载体pYEFD,并转化到营养缺陷型酿酒酵母菌株INVSc1中,在选择培养基中筛选得到酿酒酵母转化菌株YD8.YD8在合适的培养条件下,添加外源底物二十碳二烯酸和二十碳三烯酸并诱导基因表达.脂肪酸甲酯气相色谱分析表明小眼虫藻△8-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中获得了高效表达,将二十碳二烯酸和二十碳三烯酸分别转化成二高-γ-亚麻酸和二十碳四烯酸,其底物转化率分别达到了31.2%和46.3%.
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| 关 键 词： | △8-脂肪酸脱氢酶 小眼虫藻 多不饱和脂肪酸 |
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