鹦鹉嗜衣原体禽鸟株的分离鉴定及小鼠呼吸道感染模型的建立

摘要：【目的】优化鹦鹉热嗜衣原体（Chlamydophila psittaci，C. psittaci，Cps）禽鸟株分离培养技术，建立Cps呼吸道感染的小鼠模型。【方法】从禽鸟肝组织中抽提总DNA，PCR法体外扩增Cps ompA基因，初步鉴定Cps阳性标本；同时将阳性标本的肝组织匀浆液接种到HeLa和Vero细胞中培养，Giemsa和免疫荧光染色法鉴定衣原体包涵体。将临床株扩大培养后，用2×104 、2×105 、2×106 IFU三个剂量鼻内接种小鼠，分别于感染后5d和10d处死小鼠，显微镜观察受染小鼠各脏器病理变化。【结果】采用PCR扩增Cps ompA基因，从100只禽鸟标本中检测到阳性Cps标本6例（6%），并成功地在HeLa及Vero细胞中培养出3例，且Vero细胞内的衣原体包涵体体积大，结构致密，对衣原体感染引起的宿主细胞溶解耐受性较HeLa细胞强，更适合用于Cps的分离培养及体外研究。成功建立Cps的鼠呼吸道感染模型，105IFU 是建立Cps呼吸道感染小鼠模型的适宜菌量。【结论】优化了Cps临床株的分离培养技术，成功建立了Cps呼吸道感染小鼠模型，为Cps流行病学调查及研究衣原体的致病性和致病机制奠定基础。

Isolation of Chlamydophila psittaci from avian samples and establishment of a respiratory infection murine model