| 苏云金芽孢杆菌沉默基因cry2Ab3在大肠杆菌中表达及杀虫活性研究 |
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| 引用本文： | 陈中义 李长友 刘加宝 张杰 黄大昉. 苏云金芽孢杆菌沉默基因cry2Ab3在大肠杆菌中表达及杀虫活性研究[J]. 微生物学报, 2002, 42(5): 561-566 |
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| 作者姓名： | 陈中义 李长友 刘加宝 张杰 黄大昉 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094
2. 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094;中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 |
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| 基金项目： | 国家转基因植物研究与开发产业化专项课题 (J99 A 0 33)~~ |
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| 摘 要： | 对苏云金芽孢杆菌C002菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT3152Ab进行亚克隆和序列测定，在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3。序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列，但没有功能性启动子，为沉默基因。根据大肠杆菌T7表达载体pET21b克隆位点和cry2Ab3开放阅读框架(ORF)两端序列，设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3，高保真PCR扩增获得cry2Ab3完整ORF，经酶切、连接构建了重组表达质粒pET2Ab3。表达质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导后，SDSPAGE电泳证实了cry2Ab3的表达。生物测定显示诱导培养物对棉铃虫初孵幼虫和小菜蛾二龄幼虫具有杀虫活性，能明显抑制二化螟二龄幼虫生长，但对甜菜夜蛾和玉米螟没有明显活性。进一步提取Cry2Ab3蛋白，生测结果表明其对棉铃虫LC50为32.55μg/g。
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| 关 键 词： | 苏云金芽孢杆菌， 杀虫晶体蛋白基因， 基因表达， 杀虫活性 |
| 文章编号： | 0001-6209(2002)05-0561-06 |
| 修稿时间： | 2001-11-02 |
Expression and Insecticidal Activities Analysis of Silent Gene cry2Ab3 form Bacillus thuringiensis C002 Strain |
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| Chen Zhongyi Li Changyou Liu Jiabao Zhang Jie Huang Dafang . Expression and Insecticidal Activities Analysis of Silent Gene cry2Ab3 form Bacillus thuringiensis C002 Strain[J]. Acta microbiologica Sinica, 2002, 42(5): 561-566 |
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| Authors: | Chen Zhongyi Li Changyou Liu Jiabao Zhang Jie Huang Dafang |
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| Affiliation: | Chen Zhongyi 1 Li Changyou 1 Liu Jiabao 1 Zhang Jie 1 Huang Dafang 1,2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus thuringiensis cry genes Gene expression Insecticidal activites |
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