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| 野生及变异的HBsAg在毕赤酵母中的重组表达 | |
| 作者单位： | ;1.中国食品药品检定研究院 |
| 摘 要： | 目的表达野生及变异的乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原,为评价其免疫诊断试剂的敏感性提供依据。方法利用含有野生型和3种突变型乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)序列为模板PCR进行扩增,将目的片段胶回收后,进行酶切与酵母表达载体pPICZA和pPICZα连接。电转化酵母菌株GS115,通过使用抗生素Zeocine加压筛选,获得高拷贝菌株。挑选多个单克隆菌株在BMMY中诱导表达,选择表达量高的菌株用于后续研究。结果构建野生型HBsAg以及突变型T126N、D144A、G145R三种重组质粒。通过对157株菌株筛选,获得1株野生型和3株突变型表达量高的菌株。表达产物经雅培Architect i2000的检测试剂、确证试剂以及WB(Western blotting)检测,结果均为阳性。结论成功表达了野生及变异的HBsAg,为评价国产HBsAg诊断试剂对变异株的检测能力提供了依据。 |
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 变异体 毕赤酵母 表达 |
HBsAg from wild-type hepatitis B virus and HBV variants expressed in pichia pastoris |
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| Keywords: | |