| 寡聚核苷酸介导的基因突变技术创制抗除草剂烟草新种质北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 谢宇峰,秦利军.寡聚核苷酸介导的基因突变技术创制抗除草剂烟草新种质北大核心CSCD[J].广西植物,2022,42(9):1551-1560. |
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| 作者姓名： | 谢宇峰 秦利军 |
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| 作者单位： | 贵州大学 农业生物工程研究院/山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室/生命科学学院, 贵阳 550025 |
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| 基金项目： | 贵州大学人才引进基金( [2015]24 号); 贵州大学人才培育项目(贵州科技计划项目 [2018]5781号)[Supported by Talent Fund of Guizhou University( [2015] 24); Talent Training Project of Guizhou University([2018] 5781)]。 |
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| 摘 要： | 为进一步优化烟草(Nicotiana tabacum)品种‘K326’的种质,该研究采用寡聚核苷酸介导的基因突变(oligonucleotide-mediated mutagenesis,OMM)技术,利用植物中支链氨基酸合成途径中第一个关键酶——乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase,ALS)突变后烟草对氯磺隆除草剂不敏感且产生抗性的特征,以及NCBI报道的ALS基因序列同源克隆了烟草品种‘K326’中的ALS基因,并根据ALS基因序列设计用于定点突变的RNA/DNA嵌合体,导入烟草品种‘K326’创制对氯磺隆除草剂具有抗性的烟草新种质。结果表明:(1)烟草品种‘K326’具有2条ALS基因,即ALS SuRA和ALS SuRB,大小分别为2004 bp和2010 bp。(2)根据2个基因的保守位点ALS SuRA 588脯氨酸位点和ALS SuRB 1719色氨酸位点设计用于ALS基因核苷酸第588位点的Chl-588嵌合体和第1719位点的Chl-1719嵌合体。(3)利用基因枪成功将这2个片段导入烟草愈伤组织,愈伤组织依次经抗性芽分化和生根,共获得氯磺隆抗性植株22株。(4)抗性植株ALS酶活性测定显示,8株抗性植株具有较强的活性,进一步对抗性植株中跨突变位点保守扩增、测序,最终确定有2株(f11和b18)分别在588、1719位点产生定点突变。综上认为,该研究在获得烟草品种‘K326’抗氯磺隆新种质同时,也为培育抗性烟草新种质提供了理想的亲本材料。
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| 关 键 词： | 烟草 ALS基因 除草剂抗性 氯磺隆 OMM技术 |
| 收稿时间： | 2021/4/10 0:00:00 |
Creating new tobacco germplasm with herbicide-
resistance based on oligonucleotide-mediated
mutagenesis(OMM)technology |
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| XIE Yufeng,QIN Lijun.Creating new tobacco germplasm with herbicide-
resistance based on oligonucleotide-mediated
mutagenesis(OMM)technology[J].Guihaia,2022,42(9):1551-1560. |
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| Authors: | XIE Yufeng QIN Lijun |
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| Institution: | Institute of Agro-Bioengineering, Key Laboratory of Plant Resources Conservation and Germplasm Innovation in Mountainous
Region(Ministry of Education)and College of Life Sciences, Guizhou University, Guiyang 550025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tobacco ALS gene herbicide resistance chlorsulfuron OMM technology |
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