减少寡聚体形成的重组人碱性成纤维细胞生长因子的改造 |
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引用本文: | 冯辉,李校堃,吴晓萍,苏志坚,郑青,黄亚东. 减少寡聚体形成的重组人碱性成纤维细胞生长因子的改造[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(1): 48-52 |
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作者姓名: | 冯辉 李校堃 吴晓萍 苏志坚 郑青 黄亚东 |
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作者单位: | 暨南大学药学院生物制药教研室 |
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基金项目: | 国家"863"计划资助项目(2001AA215131),国家"十五"重大生物医药专项(2002AA2Z3318) |
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摘 要: | 采用PCR突变技术改造人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)cDNA,将扩增的cDNA片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21(DE3)/pE33c-[Ser69,87]hbFGF,用IPTG诱导表达,其[Se^69,87]hbFGF的表达量占菌体总蛋白30%。通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法获得了纯度达98%的[Se,^69,87]hbFGF样品。用MTT法测得纯化的[Ser^69,87]hbFGF样品与野生型hbFGF促Balb/c 3T3细胞增殖的比活性相当。以野生型hbFGF作对照,分析反复冻融对突变体[Ser^69,87]hbFGF形成寡聚体的影响,并在25℃和37℃的条件下分析其寡聚体的形成情况。结果表明,不管是反复冻融还是在25℃和37℃的条件下,突变体[Se^69,87]hbFGF形成的寡聚体都较野生型hbFGF明显减少。
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关 键 词: | 人碱性成纤维细胞生长因子 突变体 寡聚体 |
收稿时间: | 2005-10-12 |
修稿时间: | 2004-06-17 |
Modification of Recombinant Human Basic Fibroblast Growth Factor To Reduce Oligomers Formation |
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Abstract: | |
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Keywords: | hbFGF Mutant Oligomers |
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