| DNA甲基转移酶RNAi干涉载体的构建及其鉴定 |
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| 引用本文： | 王志伟,于小青,郭兴东,邝美华,余龙江,栗茂腾,付春华.DNA甲基转移酶RNAi干涉载体的构建及其鉴定[J].现代生物医学进展,2010,10(17). |
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| 作者姓名： | 王志伟 于小青 郭兴东 邝美华 余龙江 栗茂腾 付春华 |
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| 摘 要： | DNA甲基化(DNA Methylation)是真核生物基因组最常见的DNA共价修饰形式,影响蛋白质-DNA的相互作用,在基因表达的调控上起着重要作用,RNAi(RNA interference)干涉是关闭特定基因功能的新技术,在植物功能基因组、植物发育及生理代谢途径调控等方面有着广泛应用.本文根据植物DNA甲基转移酶(DNMTs)的保守序列设计引物,首先从拟南芥总基因组DNA中克隆出DNA甲基转移酶基因保守片段,然后以此保守片段为模板扩增长度约570bp,的靶序列用于构建RNAi载体.根据RNAi作用机制,将570bp靶序列正向、反向连接到pHANNIBAL载体上,然后将带有此反向重复结构的完整OFF框连接到植物表达栽体pGreell上,经过酶切鉴定和测序分析证实DNA甲基转移酶RNAi重组表达载体构建成功.转化红豆衫细胞表明该干涉载体具有生物学功能,为研究受DNA甲基化调控的性状改良打下基础.
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| 关 键 词： | DNA甲基化转移酶 RNAi 载体构建 |
Construction and Evaluation of DNAMethyltransferase Vector for RNA Interference |
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| WANG Zhi-wei,YU Xiao-qing,GUO Xing-dong,KUANG Mei-hua,YU Long-jiang,LI Mao-teng,FU Chan-hua.Construction and Evaluation of DNAMethyltransferase Vector for RNA Interference[J].Progress in Modern Biomedicine,2010,10(17). |
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| Authors: | WANG Zhi-wei YU Xiao-qing GUO Xing-dong KUANG Mei-hua YU Long-jiang LI Mao-teng FU Chan-hua |
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