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转座子Tn4560在吸水链霉菌应城变种中的转座
引用本文:邓子新,周秀芬.转座子Tn4560在吸水链霉菌应城变种中的转座[J].微生物学报,1994,34(6).
作者姓名:邓子新  周秀芬
作者单位:华中农业大学微生物科学与技术系;华中农业大学微生物科学与技术系 武汉
基金项目:国家教委,国家自然科学基金委员会资助
摘    要:Tn4556是在弗氏链霉菌UC8592中发现的一个类似于Tn3的转座子,在它转坐的非必需区中间插入紫霉素抗性基因vph所组成的复合体(Tn4556::vph),称为Tn4560.把Tn4560克隆到一个温敏性质粒pMT660(由PIJ702衍生而来)构建的重组质粒(pMT660::Tn4560)称为pUC1169.pUC1169不能直接转化吸水链霉菌应城变种1O-22,但可以以一定的频率转化其衍生菌株Q105(至少丧失了一个内源质粒的受体菌株.)从转化子中检测DNA,可以观察到完整的PUC1169的存在(仍为高拷贝).将携带了pUC1169的Q105菌株的孢子悬液以一定的稀释度涂布到无抗生素的平板上获得单个分散的菌株,把平板放在39℃下培养,待菌落长出丰满的孢子后,再分别影印到含有紫霉素和硫链丝菌素的培养基平板上,分离紫霉素抗性(vio~r)和硫链丝菌素敏感(thio~s)的菌落,即为pMT660“自杀”,而Tn4560在细胞中发生了转座的个体.从18个这类菌落中提取总DNA,经PvuⅡ酶解后,在琼脂糖凝胶上电泳,把电泳后的DNA转移到硝酸纤维膜上,与非放射性方法标记的pUC1169探针杂交揭示,每一个衍生菌…

关 键 词:链霉菌  转座

TRANSPOSITION OF Tn4560 IN STREPTOMYCES HYGROSCOPICUS VAR. YINGCHENGENSIS
Deng Zixin Zhou Xiufen.TRANSPOSITION OF Tn4560 IN STREPTOMYCES HYGROSCOPICUS VAR. YINGCHENGENSIS[J].Acta Microbiologica Sinica,1994,34(6).
Authors:Deng Zixin Zhou Xiufen
Abstract:
Keywords:Streptomyces  Transposition
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