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| 人神经生长因子信号肽介导β-内啡肽的分泌表达 | |
| 作者姓名： | 徐学武 裴树俊 黄盛东 俞卫锋 |
| 作者单位： | 1. 第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科 2. 第二军医大学长海医院胸心外科实验室,上海,200438 |
| 摘 要： | 目的:构建人神经生长因子信号肽与人β-内啡肽融合基因的真核表达载体,研究人神经生长因子信号肽介导β-内啡肽的分泌表达.方法:取得人基因组后,PCR 法获取人的神经生长因子信号肽部分序列及人β-内啡肽序列;通过 SOE-PCR法将两段 DNA 序列连接,然后插入到真核表达载体内,测序正确后扩增转染级的真核表达载体.表达载体脂质体法转染 NIH3T3细胞,转染后 48-72h 收集细胞及培养上清,RT-PCR 法检测融合基因的转录.RIA 法测定细胞外β-内啡肽的浓度.结果:成功构建全人源的分泌型表达β-内啡肽的真核表达载体,DNA 序列经测序完全符合实验设计;融合基因能够顺利地得到转录并进行表达翻译,在细胞培养上清中可检测到其产物.结论:构建的真核表达载体能够分泌表达人β-内啡肽,提示人神经生长因子信号肽序列能够发挥其介导蛋白产物分泌表达的作用. |
| 关 键 词： | 神经生长因子 分泌型表达 β-内啡肽 人神经生长因子 信号肽 内啡肽 分泌表达 Secretory Expression Mediated Human Nerve Growth Factor Peptide Signal 作用 蛋白产物 达人 体能 真核表达载 可检测 翻译 实验设计 完全 分泌型 人源 |
| 文章编号： | 1004-311X（2008）01-0021-03 |
| 收稿时间： | 2007-09-25 |
| 修稿时间： | 2007-11-14 |
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