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A型流感病毒NS1基因密码子去优化改造引起病毒毒力减弱
引用本文:栾世家,潘蔚绮,李婷,杨化强,张北武,李锋,陈凌.A型流感病毒NS1基因密码子去优化改造引起病毒毒力减弱[J].生物工程学报,2009,25(5):720-726.
作者姓名:栾世家  潘蔚绮  李婷  杨化强  张北武  李锋  陈凌
作者单位:1. 中国科学院广州生物医药与健康研究院,广州,510663;中国科学技术大学医药生物技术系,合肥,230027
2. 中国科学院广州生物医药与健康研究院,广州,510663;广州呼吸疾病研究所呼吸疾病国家重点实验室,广州,510120
3. 中国科学院广州生物医药与健康研究院,广州,510663
4. 中国科学院广州生物医药与健康研究院,广州,510663;中国科学技术大学医药生物技术系,合肥,230027;广州呼吸疾病研究所呼吸疾病国家重点实验室,广州,510120
基金项目:广州市科技计划项目(No.2006E1-E0011)资助~~
摘    要:根据A型流感病毒密码子使用偏嗜性,选取稀有密码子对A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒NS1基因内部110个氨基酸区域进行密码子同义突变改造,并全基因合成NS基因,利用反向遗传操作技术拯救出含有密码子去优化NS1基因的重组病毒(deoNS)。体外细胞噬斑形成实验和病毒生长曲线证明该病毒在MDCK细胞内的感染和复制能力比野生型病毒低约1000倍;BALB/c小鼠体内致病力实验证明deoNS病毒不能引起小鼠发病和死亡,该病毒在小鼠肺内的复制滴度比野生型病毒低100~1000倍。本研究探索了通过基因组密码子去优化改造途径降低A型流感病毒毒力的可行性,首次证明流感病毒NS1基因密码子去优化同义突变可以降低病毒毒力,为流感减毒活疫苗的研究提供了新的思路。

关 键 词:A型流感病毒  NS1  基因  密码子去优化  致弱  减毒活疫苗  
收稿时间:2009/1/23 0:00:00

Rescued influenza A virus with codon deoptimized NS1 gene is attenuated both in vitro and in vivo
Shijia Luan,Weiqi Pan,Ting Li,Huaqiang Yang,Beiwu Zhang,Feng Li and Ling Chen.Rescued influenza A virus with codon deoptimized NS1 gene is attenuated both in vitro and in vivo[J].Chinese Journal of Biotechnology,2009,25(5):720-726.
Authors:Shijia Luan  Weiqi Pan  Ting Li  Huaqiang Yang  Beiwu Zhang  Feng Li and Ling Chen
Abstract:To develop novel live attenuated influenza vaccine, we explored the feasibility to attenuate influenza virus by codon deoptimization of NS1.According to the codon usage bias in influenza A virus, we designed and synthesized a condon-deoptimized NS gene by substituting codons of 110 amino acids in the NS1 gene of A/Puerto Rico/8/34(H1N1) with unpreferred synonymous codons.The influenza A virus with the codon deoptimized NS1 gene(deoNS virus) was rescued by reverse genetics.Plaque forming assay and virus grow...
Keywords:influenza A virus  NS1 gene  codon-deoptimization  attenuation  live influenza vaccine  
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