| 奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定 |
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| 引用本文： | 李学仁,王海震,葛菲菲,王旭东,曹瑞兵,陈溥言. 奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定[J]. Virologica Sinica, 2004, 19(4): 356-359 |
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| 作者姓名： | 李学仁 王海震 葛菲菲 王旭东 曹瑞兵 陈溥言 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室 江苏南京210095(李学仁，王海震，葛菲菲，王旭东，曹瑞兵)，南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室 江苏南京210095(陈溥言) |
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| 摘 要： | 经刀豆素(conA)刺激诱导奶牛外周血淋巴细胞,应用RT-PCR方法从其总RNA中对奶牛γ干扰素基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经SDS-PAGE分析,原核表达产物为16kDa的重组蛋白,占菌体总蛋白的42%,表达产物以包涵体形式存在。经7mol/L盐酸胍的变性液溶解及0.5mol/L盐酸胍复性液处理,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化,细胞病变抑制法结果表明,重组牛IFN-γ具有较高的干扰素活性,约为6.0×105U/mg。
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| 关 键 词： | 奶牛 γ干扰素 基因 表达 活性 刀豆素 |
Expression and Activity Determination of Bovine Interferon-gamma Gene |
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| LI Xue-ren,WANG Hai-zhen,GE Fei-fei,WANG Xu-dong,CAO Rui-bing,CHEN Pu-yan. Expression and Activity Determination of Bovine Interferon-gamma Gene[J]. 中国病毒学(英文版), 2004, 19(4): 356-359 |
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| Authors: | LI Xue-ren WANG Hai-zhen GE Fei-fei WANG Xu-dong CAO Rui-bing CHEN Pu-yan |
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| Affiliation: | LI Xue-ren,WANG Hai-zhen,GE Fei-fei,WANG Xu-dong,CAO Rui-bing,CHEN Pu-yan** |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bovine Interferon-gamma Prokaryotic expression Detection for activation |
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