| 富含RNA酶大鼠腺体组织总RNA提取方法改良 |
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| 引用本文： | 刘铁牛,张达培,蒋旭,张林锋,岑维文,李孟琪,樊鸿宇,陈昱晓,覃晴,谢莹,袁志兵. 富含RNA酶大鼠腺体组织总RNA提取方法改良[J]. 基因组学与应用生物学, 2021, 40(2): 548-555. DOI: 10.13417/j.gab.040.000548 |
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| 作者姓名： | 刘铁牛 张达培 蒋旭 张林锋 岑维文 李孟琪 樊鸿宇 陈昱晓 覃晴 谢莹 袁志兵 |
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| 作者单位： | 广西医科大学睿谷医学检验实验室,南宁,530000;广西医科大学生命科学研究院,南宁,530000;广西医科大学睿谷医学检验实验室,南宁,530000;中国人民解放军陆军军医大学,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 为了改良传统提取富含RNA酶大鼠胰腺和腮腺组织总RNA方法,本研究将组织样本分成对照组,0.5％,1.0％和2.0％β-巯基乙醇处理组,对照组采用Trizol法提取总RNA,β-巯基乙醇处理组分别于Trizol试剂中加入0.5％,1％,2％β-巯基乙醇.测定不同处理组单链核酸含量、完整性,A260/280和A260/230;采用实时荧光定量PCR检测管家基因β-actin,GAPDH,胰腺淀粉酶AMY2和腮腺水通道蛋白AQP-5表达情况,并通过计算扩增效率,验证β-巯基乙醇是否对后续PCR实验有影响.结果表明,不同处理组单链核酸含量、A260/280,A260/230无显著差异,β-巯基乙醇组RNA完整性显著高于对照组,1.0％,2.0％β-巯基乙醇组RNA完整性显著高于0.5％β-巯基乙醇组,1.0％β-巯基乙醇组RNA完整性与2.0％β-巯基乙醇组无显著差异;添加1.0％β-巯基乙醇对后续PCR试验无影响.综上所述,在传统Trizol法内添加β-巯基乙醇可显著提高胰腺和腮腺组织总RNA提取质量,其中添加1.0％β-巯基乙醇是最佳提取方案.
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| 关 键 词： | RNA酶 总RNA 腺体 改良方法 |
Method Improvement for Extract Total RNA from Rats'Ribonuclease-rich Gland Tissue |
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| Liu Tieniu,Zhang Dapei,Jiang Xu,Zhang Linfeng,Cen Weiwen,Li Mengqi,Fan Hongyu,Chen Yuxiao,Qin Qing,Xie Ying,Yuan Zhibing. Method Improvement for Extract Total RNA from Rats'Ribonuclease-rich Gland Tissue[J]. Genomics and Applied Biology, 2021, 40(2): 548-555. DOI: 10.13417/j.gab.040.000548 |
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| Authors: | Liu Tieniu Zhang Dapei Jiang Xu Zhang Linfeng Cen Weiwen Li Mengqi Fan Hongyu Chen Yuxiao Qin Qing Xie Ying Yuan Zhibing |
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