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富含RNA酶大鼠腺体组织总RNA提取方法改良
引用本文:刘铁牛,张达培,蒋旭,张林锋,岑维文,李孟琪,樊鸿宇,陈昱晓,覃晴,谢莹,袁志兵.富含RNA酶大鼠腺体组织总RNA提取方法改良[J].基因组学与应用生物学,2021,40(2):548-555.
作者姓名:刘铁牛  张达培  蒋旭  张林锋  岑维文  李孟琪  樊鸿宇  陈昱晓  覃晴  谢莹  袁志兵
作者单位:广西医科大学睿谷医学检验实验室,南宁,530000;广西医科大学生命科学研究院,南宁,530000;广西医科大学睿谷医学检验实验室,南宁,530000;中国人民解放军陆军军医大学,重庆,400038
摘    要:为了改良传统提取富含RNA酶大鼠胰腺和腮腺组织总RNA方法,本研究将组织样本分成对照组,0.5%,1.0%和2.0%β-巯基乙醇处理组,对照组采用Trizol法提取总RNA,β-巯基乙醇处理组分别于Trizol试剂中加入0.5%,1%,2%β-巯基乙醇.测定不同处理组单链核酸含量、完整性,A260/280和A260/230;采用实时荧光定量PCR检测管家基因β-actin,GAPDH,胰腺淀粉酶AMY2和腮腺水通道蛋白AQP-5表达情况,并通过计算扩增效率,验证β-巯基乙醇是否对后续PCR实验有影响.结果表明,不同处理组单链核酸含量、A260/280,A260/230无显著差异,β-巯基乙醇组RNA完整性显著高于对照组,1.0%,2.0%β-巯基乙醇组RNA完整性显著高于0.5%β-巯基乙醇组,1.0%β-巯基乙醇组RNA完整性与2.0%β-巯基乙醇组无显著差异;添加1.0%β-巯基乙醇对后续PCR试验无影响.综上所述,在传统Trizol法内添加β-巯基乙醇可显著提高胰腺和腮腺组织总RNA提取质量,其中添加1.0%β-巯基乙醇是最佳提取方案.

关 键 词:RNA酶  总RNA  腺体  改良方法

Method Improvement for Extract Total RNA from Rats'Ribonuclease-rich Gland Tissue
Liu Tieniu,Zhang Dapei,Jiang Xu,Zhang Linfeng,Cen Weiwen,Li Mengqi,Fan Hongyu,Chen Yuxiao,Qin Qing,Xie Ying,Yuan Zhibing.Method Improvement for Extract Total RNA from Rats'Ribonuclease-rich Gland Tissue[J].Genomics and Applied Biology,2021,40(2):548-555.
Authors:Liu Tieniu  Zhang Dapei  Jiang Xu  Zhang Linfeng  Cen Weiwen  Li Mengqi  Fan Hongyu  Chen Yuxiao  Qin Qing  Xie Ying  Yuan Zhibing
Abstract:
Keywords:
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