人硫氧还蛋白cDNA的克隆、表达及其多克隆抗体制备 |
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引用本文: | 陈孝平,唐文心,陈欢,付春华.人硫氧还蛋白cDNA的克隆、表达及其多克隆抗体制备[J].国外医学:分子生物学分册,2007,4(3):221-224. |
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作者姓名: | 陈孝平 唐文心 陈欢 付春华 |
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作者单位: | 华中科技大学生命科学与技术学院生物物理研究所,武汉市430074 |
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摘 要: | 目的 制备硫氧还蛋白1 (thioredoxin-1,Trx-1)多克隆抗体.方法 从乳腺癌细胞系MCF-7中用RT-PCR的方法得到了Trx-1全长基因,将它克隆到原核表达载体上进行大量的表达和纯化,纯化的蛋白对新西兰大白兔进行背部多点注射,40 d后取其血清用梯度饱和硫酸铵沉淀的方法进行多克隆抗体的纯化.用ELISA和Western印迹实验测定抗体效果.结果 成功获得了Trx-1全长cDNA,通过原核表达得到了大量Trx-1蛋白,并制备了高效价的多克隆抗体.结论 此多克隆抗体对Trx-1蛋白具有良好的识别能力,可以应用于Trx-1的功能研究.
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关 键 词: | 硫氧还蛋白 cDNA克隆 多克隆抗体 |
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