| 高通量筛选高产酪氨酸的酿酒酵母菌株 |
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| 引用本文： | 刘堂浩,李由然,张梁,丁重阳,顾正华,石贵阳,徐沙. 高通量筛选高产酪氨酸的酿酒酵母菌株[J]. 生物工程学报, 2021, 37(9): 3348-3360 |
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| 作者姓名： | 刘堂浩 李由然 张梁 丁重阳 顾正华 石贵阳 徐沙 |
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| 作者单位： | 1 江南大学 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122;2 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划 (No. 2019YFA0905500) 资助。 |
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| 摘 要： | 酪氨酸是重要的芳香族氨基酸，自身不仅具有重要的营养价值，也是合成香豆素类化合物和黄酮类化合物的重要前体。文中以实验室前期构建的一株解除了酪氨酸反馈抑制的酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae LTH0 (ARO4K229L，ARO7G141S，Δaro10，Δzwf1，Δura3) 为出发菌株，异源表达甜菜黄素合成基因DOD和CYP76AD1，使酿酒酵母产生黄色荧光。然后利用紫外诱变和常压室温等离子体 (Atmospheric and room temperature plasma，ARTP) 诱变相结合的方法对上述菌株进行随机诱变，并通过流式细胞仪筛选荧光强度显著提高的突变株。其中突变株LTH2-5-DOD-CYP76AD1在激发波长485 nm、发射波长505 nm处荧光强度为 (5 941±435) AU/OD，比诱变前提高了8.37倍。对诱变后荧光强度提高较多的14株突变株进行发酵生产酪氨酸，胞外酪氨酸产量最高为26.8 mg/L，比出发菌株提高了3.96倍。进一步异源表达约翰逊黄杆菌Flavobacterium johnsoniae来源的酪氨酸解氨酶FjTAL，对香豆酸产量达到119.8 mg/L，比出发菌株LTH0-FjTAL提高了1.02倍。
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| 关 键 词： | 酪氨酸，对香豆酸，甜菜黄素，高通量筛选 |
| 收稿时间： | 2020-11-26 |
High-throughput screening of Saccharomyces cerevisiae efficiently producing tyrosine |
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| Tanghao Liu,Youran Li,Liang Zhang,Zhongyang Ding,Zhenghua Gu,Guiyang Shi,Sha Xu. High-throughput screening of Saccharomyces cerevisiae efficiently producing tyrosine[J]. Chinese journal of biotechnology, 2021, 37(9): 3348-3360 |
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| Authors: | Tanghao Liu Youran Li Liang Zhang Zhongyang Ding Zhenghua Gu Guiyang Shi Sha Xu |
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| Affiliation: | 1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China;2 School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tyrosine p-coumaric acid betaxanthins high-throughput screening |
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