| 人H-ras基因真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞生长的促进作用 |
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| 引用本文： | 张云静,冯滢滢,徐小洁,王涛,张柯,梁迎春,张蓉,叶棋浓.人H-ras基因真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞生长的促进作用[J].生物技术通讯,2015(2):190-193. |
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| 作者姓名： | 张云静 冯滢滢 徐小洁 王涛 张柯 梁迎春 张蓉 叶棋浓 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所;第二炮兵总医院;军事医学科学院科技部 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81472589,31100604);北京市自然科学基金(7132155);北京市科技新星计划(Z141102001814055);军事医学科学院创新基金转化医学项目(ZHYX003) |
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| 摘 要： | 目的:构建癌基因H-ras真核表达载体,并检测其对肿瘤细胞生长的作用。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增H-ras基因片段,将其插入p XJ-40-myc载体后转染人胚肾HEK293T细胞,用Western印迹检测该融合蛋白的表达;将重组质粒转染人肠癌HCT-116细胞和人肝癌Hep G2细胞,通过细胞生长曲线(CCK8法)对myc-H-ras影响肿瘤细胞生长的情况进行分析。结果:利用PCR技术,从乳腺文库中扩增出H-ras基因片段,并成功插入p XJ-40-myc载体;重组质粒转染HEK293T细胞,经Western印迹检测融合蛋白正确表达;细胞生长曲线结果显示,转染myc-H-ras的结肠癌HCT-116细胞和人肝癌Hep G2细胞比转染空载体的细胞生长快。结论:构建了人H-ras基因真核表达载体,为进一步研究ras基因在肿瘤细胞中的作用奠定了一定基础。
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| 关 键 词： | H-ras基因 真核表达载体 肿瘤细胞 |
Construction of Human H-ras Eukaryotic Expression Vector and its Proliferative Role in Cancer Cell Growth |
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| ZHANG Yun-Jing;FENG Ying-Ying;XU Xiao-Jie;WANG Tao;ZHANG Ke;LIANG Ying-Chun;ZHANG Rong;YE Qi-Nong.Construction of Human H-ras Eukaryotic Expression Vector and its Proliferative Role in Cancer Cell Growth[J].Letters in Biotechnology,2015(2):190-193. |
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| Authors: | ZHANG Yun-Jing;FENG Ying-Ying;XU Xiao-Jie;WANG Tao;ZHANG Ke;LIANG Ying-Chun;ZHANG Rong;YE Qi-Nong |
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| Institution: | ZHANG Yun-Jing;FENG Ying-Ying;XU Xiao-Jie;WANG Tao;ZHANG Ke;LIANG Ying-Chun;ZHANG Rong;YE Qi-Nong;Beijing Institute of Biotechnology;Second Artillery General Hospital;Academy of Military Medical Sciences; |
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