重组人α降钙素基因相关肽在大肠杆菌中表达条件的优化 |
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作者姓名: | 赵丹丹 于晓光 班莺 邹海峰 林平 徐华锋 |
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作者单位: | 哈尔滨医科大学,生物化学与分子生物学教研室,中国黑龙江,哈尔滨,150086 |
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基金项目: | 黑龙江省自然科学基金项目(D01 55),哈尔滨市学科后备带头人基金项目(0171218001)~~ |
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摘 要: | 为提高人α降钙素基因相关肽(bαCGRP)在大肠杆菌中的表达量,研究了本室构建的pET-hαCGRP重组质粒在E.coliBL21trxB(DE3)pKysS宿主菌中的表达条件.经SDS-PAGE分析和YLN2000凝胶影像分析结果表明,重组菌以LB为培养基,氨苄青霉素浓度为50mg/L,开始诱导时的菌体密度为OD600=0.6~0.8,所加IPTG的浓度为0.75mmol/L,37℃摇床180±5r/min振荡诱导培养4h时,可获得高效表达的hαCGRP融合蛋白.重组蛋白的最高表达量占菌体总蛋白的70%~80%;它主要以可溶性形式存在,为下一步纯化工作提供了方便.
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关 键 词: | 重组人α降钙素基因相关肽 大肠杆菌 表达条件 SDS-PAGE分析 |
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