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重组人α降钙素基因相关肽在大肠杆菌中表达条件的优化
作者姓名:赵丹丹  于晓光  班莺  邹海峰  林平  徐华锋
作者单位:哈尔滨医科大学,生物化学与分子生物学教研室,中国黑龙江,哈尔滨,150086
基金项目:黑龙江省自然科学基金项目(D01 55),哈尔滨市学科后备带头人基金项目(0171218001)~~
摘    要:为提高人α降钙素基因相关肽(bαCGRP)在大肠杆菌中的表达量,研究了本室构建的pET-hαCGRP重组质粒在E.coliBL21trxB(DE3)pKysS宿主菌中的表达条件.经SDS-PAGE分析和YLN2000凝胶影像分析结果表明,重组菌以LB为培养基,氨苄青霉素浓度为50mg/L,开始诱导时的菌体密度为OD600=0.6~0.8,所加IPTG的浓度为0.75mmol/L,37℃摇床180±5r/min振荡诱导培养4h时,可获得高效表达的hαCGRP融合蛋白.重组蛋白的最高表达量占菌体总蛋白的70%~80%;它主要以可溶性形式存在,为下一步纯化工作提供了方便.

关 键 词:重组人α降钙素基因相关肽 大肠杆菌 表达条件 SDS-PAGE分析
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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