| 烟曲霉脯氨酰内肽酶在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达与重组酶性质 |
| |
| 引用本文： | 李宁环,仝征,沈微,陈献忠,樊游,SINGH Suren,王正祥.烟曲霉脯氨酰内肽酶在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达与重组酶性质[J].微生物学通报,2013,40(3):391-399. |
| |
| 作者姓名： | 李宁环 仝征 沈微 陈献忠 樊游 SINGH Suren 王正祥 |
| |
| 作者单位： | 1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室生物工程学院生物资源与生物能源研究中心 江苏无锡21412
2. Department of Biotechnology and Food Technology, Durban University of Technology,Durban 4001, South Africa |
| |
| 基金项目： | 科技部国际科技合作项目(No. 2009DFA31300); 国家自然科学基金项目(No. 21006039); 111引智计划项目(No. 111-2-06) |
| |
| 摘 要： | 【目的】研究烟曲霉脯氨酰内肽酶cDNA基因的异源表达及重组酶性质。【方法】以烟曲霉CICIM F0044总RNA为模板,反转录合成cDNA;再以cDNA为模板,通过PCR扩增去除自身信号肽的脯氨酰内肽酶基因,构建表达载体pPIC9K-PEP;电转化酵母宿主菌Pichia pastoris GS115,获得重组菌PEP-09;纯化并分析重组酶性质。【结果】重组菌摇瓶发酵酶活力最高可达647.3 U/L。表达产物纯化后的分子量为63 kD左右。重组酶最适反应温度为65°C,有较好的温度稳定性,在55°C保温8 h能保留90%以上的酶活力。该酶最适pH为5.5,在pH 3.0 9.0范围内有很好稳定性,在pH 6.0 8.0的缓冲液中37°C保温10 d酶活没有明显变化。【结论】烟曲霉脯氨酰内肽酶cDNA基因在巴斯德毕赤酵母中实现了分泌表达,重组酶活性稳定,有一定的应用潜力。
|
| 关 键 词： | 烟曲霉 脯氨酰内肽酶 诱导表达 酶学性质 |
Secreted expression of prolyl endopeptidase from Aspergillus fumigatus in Pichia pastoris and characterization of the recombinant enzyme |
| |
| LI Ning-Huan,TONG Zheng,SHEN Wei,CHEN Xian-Zhong,FAN You,SINGH Suren and WANG Zheng-Xiang.Secreted expression of prolyl endopeptidase from Aspergillus fumigatus in Pichia pastoris and characterization of the recombinant enzyme[J].Microbiology,2013,40(3):391-399. |
| |
| Authors: | LI Ning-Huan TONG Zheng SHEN Wei CHEN Xian-Zhong FAN You SINGH Suren and WANG Zheng-Xiang |
| |
| Institution: | 1. The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education and Research Center of Bioresource & Bioenergy, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;2. Department of Biotechnology and Food Technology, Durban University of Technology, Durban 4001, South Africa;1. The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education and Research Center of Bioresource & Bioenergy, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Aspergillus fumigatus Prolyl endopeptidase Inducible expression Enzymatic properties |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《微生物学通报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《微生物学通报》下载免费的PDF全文 |
|
