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重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ用pET_(31)b载体的表达和纯化
作者姓名:刁建波  刘君梁  梁宋平
作者单位:1. 北京大学,蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京,100871
2. 湖南师范大学,生命科学学院,长沙,410081
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (No .39990 60 0 )~~
摘    要:化学全合成虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅰ (HWTX Ⅰ )基因在大肠杆菌中被表达 ,采用pET31b载体 ,表达产物N端为大肠杆菌酮基立体异构酶的融合蛋白 ,经亲和连续 6个组氨酸的亲和柱层析后 ,溴化氰切割融合蛋白 ,再经高效液相色谱反相柱纯化 ,得到了重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ .质谱分析及N端测序表明 ,rHWTX Ⅰ系正确表达产物 .还原复性的rHWTX Ⅰ表现出与天然HWTX Ⅰ一致的生物学活性

关 键 词:虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ  pET31b  表达与纯化  溴化氰  变复性  
收稿时间:2003-04-20
修稿时间:2002-07-04
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