分泌抗芜菁花叶病毒株系特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及抗体理化性质测定

用经芜菁花叶病毒(TuMV)免疫的BALB／c小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(Sp2／0－Agl4)融合，经3次克隆化培养和ELISA筛选，建立了5类分泌抗TuMV的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。其中4类分别对TuMV－CI株系、TuMV—C3株系、TuMV—C4株系和TuMV－c5株系具有特异性反应，第5类对TuMV 5个株系均有反应。以双抗体夹心ELISA和间接ELISA检测，上述McAb同CaMV、CMV、TMV、PVX和PVY等均不产生交叉反应，小鼠腹水McAb的滴度在1：256000--2048000之间，多为1：1024000，比常规多抗血清高400倍左右。对上述杂交瘤细胞系和McAb的生物学特性及理化性质进行了鉴定。用SDS—PAGE、Western—blotting对TuMV外壳蛋白亚基、McAb识别位点进行了分析，并就McAb区分TuMV株系进行了讨。