| 突变型hIL-2在Pichia pastoris中直接诱导表达条件研究 |
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| 引用本文： | 郭芝刚,欧阳克清,杨红,高虹,李新平,陈云高,蔡绍皙. 突变型hIL-2在Pichia pastoris中直接诱导表达条件研究[J]. 生物技术, 2003, 13(3): 11-13 |
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| 作者姓名： | 郭芝刚 欧阳克清 杨红 高虹 李新平 陈云高 蔡绍皙 |
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| 作者单位： | 1. 重庆大学分子生物学重点实验,重庆,400044
2. 成都荣高实业集团有限公司,四川,成都,610000 |
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| 摘 要： | 为了简化突变型白细胞介素-2（mutant variant human interleukin-2,MvIL-2)在毕赤酵母中的表达工艺，作者参照传统方法，设计了一种新的表达方法-直接诱导法，在该实验中，在摇瓶条件下，对OD600，诱导时间这两个重要的参数进行了重点研究，并对表达蛋白的抗原性和生物学活性进行鉴定，结果表明：在pH6.0,温度30℃，转速280r/min的条件下进行培养，菌体密度（OD600）达到40时直接在发酵液中加入1%的甲醇进行诱导表达，间隔24h补充同上浓度的甲醇，96h收集发酵液，以相同体积的培养基最后获得的总目的蛋白来比较，直接诱导法的产量是传统诱导法产量的5倍，Western blot的抗原性检测和MTT生物学活性实验证明表达的蛋白是特异性蛋白，MTT法测得突变型IL-2具有4倍于同样在毕赤酵母中表达的天然IL-2的生物活性。
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| 关 键 词： | 突变型hIL－2 诱导表达 突变型白细胞介素－2 毕赤酵母 |
| 文章编号： | 1004-311X(2003)03-0011-03 |
| 修稿时间： | 2002-12-04 |
Studies on the Conditions of the Direct Induce Expression of Mutant variant Human Interleukin-2 in Pichia pastoris |
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| GUO Zhi-gang ,OUYANG Ke-qing ,YANG Hong ,GAO Hong ,LI Xin-ping ,CHEN Yun-gao ,CAI Shao-xi. Studies on the Conditions of the Direct Induce Expression of Mutant variant Human Interleukin-2 in Pichia pastoris[J]. Biotechnology, 2003, 13(3): 11-13 |
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| Authors: | GUO Zhi-gang OUYANG Ke-qing YANG Hong GAO Hong LI Xin-ping CHEN Yun-gao CAI Shao-xi |
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| Affiliation: | GUO Zhi-gang 1,OUYANG Ke-qing 1,YANG Hong 1,GAO Hong 1,LI Xin-ping 1,CHEN Yun-gao 2,CAI Shao-xi 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | The wild type of human interleukin-2 mutant variant human interleukin-2 Pichia pastoris induce express direct induce express method transform medium induce express method |
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