| 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的敲除对北京棒杆菌PD-67的生理代谢的影响 |
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| 引用本文： | 陆敏涛,赵智,张英姿,王宇,丁久元.磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的敲除对北京棒杆菌PD-67的生理代谢的影响[J].微生物学报,2010,50(10):1334-1340. |
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| 作者姓名： | 陆敏涛 赵智 张英姿 王宇 丁久元 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院微生物研究所,北京,100101;中国科学院研究生院,北京,100049
2. 中国科学院微生物研究所,北京,100101 |
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| 摘 要： | 【目的】为了优化L-色氨酸合成的前体供应,构建北京棒杆菌PD-67(Corynebacterium pekinense PD-67)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(EC:4.1.1.31,phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPCx)基因ppc敲除的菌株,并研究ppc基因敲除对菌株生理特性的影响。【方法】运用PCR技术扩增ppc基因的上游和下游序列,构建带有目标基因内部缺失的基因整合载体。通过同源重组技术将C.pekinense PD-67的ppc基因敲除,构建ppc基因缺陷突变株C.pekinense PD-67-Δppc。通过摇瓶发酵研究突变株的生理特性,并测定突变株丙酮酸激酶和丙酮酸羧化酶的活性。【结果】PCR验证和PEPCx活性分析结果表明,筛选到ppc缺陷的突变株。摇瓶发酵结果表明,与出发菌株相比,突变株的生长速率下降,生物量降低20%,L-色氨酸积累降低62%,丙酮酸激酶活力提高,而丙酮酸羧化酶活力下降。【结论】C.pekinense PD-67的ppc基因敲除以后,对菌株的代谢影响较大。仅通过阻断PEPCx催化的回补途径,减少磷酸烯醇式丙酮酸的分支代谢,不能提高该菌株L-色氨酸的积累。
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| 关 键 词： | 关键词：北京棒杆菌 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 L-色氨酸 基因敲除 |
| 收稿时间： | 2010/4/26 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2010/5/24 0:00:00 |
Effect of phosphoenolpyruvate carboxylase gene knock-out on metabolism in Corynebacterium pekinense PD-67 |
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| Mintao Lu,Zhi Zhao,Yu Wang,Yingzi Zhang and Jiuyuan Ding.Effect of phosphoenolpyruvate carboxylase gene knock-out on metabolism in Corynebacterium pekinense PD-67[J].Acta Microbiologica Sinica,2010,50(10):1334-1340. |
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| Authors: | Mintao Lu Zhi Zhao Yu Wang Yingzi Zhang and Jiuyuan Ding |
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| Institution: | Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keywords: Corynebacterium pekinense phosphoenolpyruvate carboxylase gene knock-out L-tryptophan |
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