miR-29b对TNF—α诱导的人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的影响 |
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引用本文: | 曹运长,冷超群,文红波,许金华.miR-29b对TNF—α诱导的人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的影响[J].国外医学:分子生物学分册,2013(6):323-327. |
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作者姓名: | 曹运长 冷超群 文红波 许金华 |
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作者单位: | 南华大学药学与生物科学学院生物化学与分子生物学教研室,湖南省衡阳市421001 |
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基金项目: | 湖南省自然科学基金(No.06JJ30016),湖南省教育厅青年项目(No.0913090),衡阳市科技局项目(No.2009KJ09) |
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摘 要: | 目的探索过表达miR-29b对TNF-α 诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖与凋亡的影响及初步作用机制。方法MTT 法筛选TNF—α诱导HUVECs的最佳浓度和时间,建立细胞凋亡模型;MTY法筛选miR-29bmimic转染HUVECs的最佳转染时间和浓度:MTr法检测过表达miR-29b对TNF-α诱导HUVECs增殖活力的影响;Hoechst33342荧光染色检测过表达miR-29b对TNF—α诱导HUVECs凋亡的影响:Western印迹技术检测过表达miR-29b对Akt磷酸化水平、Bcl-2蛋白表达的影响。结果TNF—α诱导的HUVECs凋亡的最佳浓度为10ng/ml,最佳时间是48h;miR-29bmimics转染HUVECs的最佳浓度为50nmol/L,最佳作用时间是48h;过表达miR-29b能显著降低TNF-α诱导的HUVECs的增殖活力(P〈0.001);Heochst33342荧光染色结果显示。miR-29b过表达能促进TNF-α诱导的HUVECs的凋亡(P〈0.05);过表达miR-29b能显著下调Akt磷酸化(p-Akt)与Bcl-2蛋白的表达(P〈0.001)。结论过表达miR-29b可降低TNF-α诱导的HUVECs的增殖活力并促进其凋亡,其机制可能与下调Akt磷酸化、Bd-2蛋白的表达相关。
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关 键 词: | miR-29b 人脐静脉内皮细胞 TNF-α 增殖 凋亡 |
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