| 研究报告重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究 |
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| 引用本文： | 李多,杨丽娟,赵玉娇,潘玥,陈俊英,付娟娟,黄新伟,邱丽娟,孙强明.研究报告重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究[J].中国生物工程杂志,2014,34(9):4-8. |
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| 作者姓名： | 李多 杨丽娟 赵玉娇 潘玥 陈俊英 付娟娟 黄新伟 邱丽娟 孙强明 |
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| 作者单位： | 1. 北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室 昆明 650118;
2. 昆明医科大学第二附属医院 中心实验 昆明 650101 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（81171946）；云南省科技厅社会发展科技计划项目（2011CA016）；云南省自然科学基金（2009ZC187M，2012FB188）资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：表达制备重组Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1，检测该重组表达蛋白的免疫原性，为检测试剂盒的研制提供基础。方法：根据Ⅱ型登革病毒NS1蛋白基因序列（GenBank 登录号：NC_001474），对基因序列进行编码密码子优化后进行全基因合成，随后，经双酶切将目的片段克隆到表达载体pET28a上，通过IPTG诱导表达；表达产物经Western blot鉴定后，进一步进行蛋白纯化和透析复性，制备获得重组Ⅱ型登革病毒NS1蛋白。收获的NS1蛋白免疫小鼠，制备多克隆抗体，通过间接酶联免疫学方法测定其效价，检测其免疫原性。结果：成功构建了Ⅱ型登革病毒NS1蛋白的表达载体。Western blot显示表达的重组蛋白能够被NS1单抗特异性的结合，纯化复性后的重组蛋白在小鼠体内表现出良好的免疫原性。结论：重组表达的NS1蛋白有良好的免疫原性，为以后的NS1单克隆抗体的制备和登革病毒检测试剂盒的研制提供了良好的基础。
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| 关 键 词： | 登革病毒 重组蛋白 NS1蛋白 免疫原性 ELISA |
| 收稿时间： | 2014-06-20 |
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